双向电泳实验流程.doc

广州誉维生物科技仪器有限公司 PAGE PAGE 24 美国伯乐Bio-Rad广东、广西、海南生命科学消耗品代理 广州市天河区科韵路22-24号禾田大厦720-722室 Tel：020128 产品专员：唐佩君 Fax：020 双向电泳实验流程 样品制备（Sample preparation） 固相预制胶条的水化（IPG strip rehydration） 第一向等电聚焦（IEF） 胶条的平衡（IPG strip equilibration） 第二向SDS电泳（SDSelectrophresis） 凝胶的染色及检测（Detection/Staining） PDQuest软件分析（Software analysis） 质谱鉴定（Protein identification）  目　　录 　　实验材料 1．1 IPG预制胶条及载体两性电解质 1．2 蛋白质定量试剂盒及其试剂 1．3 蛋白样品制备试剂盒及其试剂 1．4 化学试剂 1．5 蛋白质Marker 1．6 染色试剂 1．7 注意事项 第二章　　SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 2. 1 溶液的配制 2. 2 SDS凝胶的配制 2. 3 操作方法 2. 4 注意事项 第三章　　双向电泳 3. 1 溶液配制 3. 2 操作步骤 3. 3 注意事项 附录1 双向电泳完整的操作步骤 附录2　　聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶的配置 附录3　　细胞样品的一般处理步骤 附录4　　组织样品的一般处理步骤  第一章 实验材料 1．1 IPG预制胶条及载体两性电解质 （一）IPG预制胶条（美国Bio-Rad公司），-20℃ 项目 规格 货号 原价(元) IPG预制胶条 pH 3-10， 7 cm 163-2000 799 IPG预制胶条 pH 3-10， 7 cm ，nonlinear（NL） 163-2002 799 IPG预制胶条 pH 4-7， 7 cm 163-2001 799 IPG预制胶条 pH 3-6， 7 cm 163-2003 799 IPG预制胶条 pH 5-8， 7 cm 163-2004 799 IPG预制胶条 pH 7-10， 7 cm 163-2005 799 IPG预制胶条 pH 3.9-5.1， 7cm 163-2028 799 IPG预制胶条 pH 4.7-5.9， 7cm 163-2029 799 IPG预制胶条 pH 5.5-6.7， 7cm 163-2030 799 IPG预制胶条 pH 6.3-8.3， 7cm 163-2031 799 IPG预制胶条 pH 3-10， 11cm 163-2014 957 IPG预制胶条 pH 3-10， 11cm，nonlinear（NL） 163-2016 957 IPG预制胶条 pH 4-7， 11cm 163-2015 957 IPG预制胶条 pH 3-6， 11cm 163-2017 957 IPG预制胶条 pH 5-8， 11cm 163-2018 957 IPG预制胶条 pH 7-10， 11cm 163-2019 957 IPG预制胶条 pH 3.9-5.1， 11cm 163-2024 957 IPG预制胶条 pH 4.7-5.9， 11cm 163-2025 957 IPG预制胶条 pH 5.5-6.7， 11cm 163-2026 957 IPG预制胶条 pH 6.3-8.3， 11cm 163-2027 957 IPG预制胶条 pH 3-10， 17cm 163-2007 1079 IPG预制胶条 pH 3-10， 17 cm，nonlinear（NL） 163-2009 1079 IPG预制胶条 pH 4-7， 17cm 163-2008 1079 IPG预制胶条 pH 3-6， 17cm 163-2010 1079 IPG预制胶条 pH 5-8， 17cm 163-2011 1079 IPG预制胶条 pH 7-10， 17cm 163-2012 1079 IPG预制胶条 pH 3.9-5.1， 17cm 163-20