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第1节 DNA重组技术的基本工具导学案
【学习目标】:
1.说明三种基本工具的作用
2.认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术支持
3.运用所学DNA重组技术的知识模拟制作重组DNA模型
【学习重点】:DNA重组技术所需基本工具的作用
【学习难点】:基因工程载体需要具备的条件
【自主学习】:
一、基因工程概念
1、概念:基因工程又是指按照人们的意愿,进行严格的设计,并通过体外_______________和_______________等技术,赋予生物以新的_______________,从而创造出更符合人们需要的新的_______________和_______________。由于基因工程是在________________上进行设计和施工的,因此又叫做________________。
二、DNA重组技术的基本工具
1、“分子手术刀”——__________________________
⑴来源:主要是从______________________________来的。
⑵作用:能够识别双链DNA分子的某种_________________,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的_____________________________断开。
⑶结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:__________和______________。
2、、“分子缝合针”——_________________________
连接酶
连接酶
来源:_____________
作用:只能“缝合”具有_____________双链DNA片段
T4DNA连接酶
来源:_____________________
作用:既可以“缝合”双链DNA片段互补的__________,又可以“缝合”双链DNA片段的____________
⑴种类
作用结果:恢复被______________________________切开的两个核苷酸之间的________________,拼接成新的DNA分子。
3、“分子运输车”——___________________________________
⑴种类:_______________、 ________________、 _______________
⑵载体具备的条件
能够在受体细胞中进行_______________,或整合到_______________上,随染色体DNA进行同步复制。
有一个或多个_______________切割位点,共外源基因插入。
具有特殊的________________,共重组DNA的鉴定和选择。
疑难解析
1、比较有关的酶
(1)DNA水解酶:能够将DNA水解成4种脱氧核苷酸,彻底水解成磷酸、脱氧核糖、四种碱基.
(2)DNA解旋酶:作用的部位是氢键,结果是DNA双螺旋打开,形成DNA单链。注意:使DNA解成两条长链的方法除用解旋酶以外,在适当的高温(如94℃
(3)DNA聚合酶:能将单个的核苷酸通过磷酸二酯键连接成DNA长链。用于DNA分子的合成。
(4)DNA连接酶:是通过磷酸二酯键连接双链DNA片段的缺口。用于基因表达载体的构建。 ⑸ 限制酶:使双链DNA分子的特定部位的磷酸二酯键断开,用于提取目的基因和切割载体。
2、DNA连接酶与DNA聚合酶作用的比较
DNA连接酶
DNA聚合酶
不同点
作用对象
双链DNA片段
单个脱氧核苷酸连接成一条与模板链互补的DNA单链
模板
不需要模板
需要DNA一条链为模板
作用结果
形成重组DNA分子
形成新的DNA分子
相同点
作用实质
都是形成磷酸二酯键,
化学本质
蛋白质
【探究案】
【探究一】基因工程的概念?注意:对本概念应从以下几个方面理解:
操作环境
操作对象
操作水平
基本过程
结果
例1.(2005高考广东)以下有关基因工程的叙述,正确的是 ( )
A、基因工程是细胞水平上的生物工程 B、基因工程的产物对人类都是有益的
C、基因工程产生的变异属于人工诱变 D、基因工程育种的优点之一是目的性强
【探究二】基因工程的三个基本工具:
1.限制性核酸内切酶---“分子手术刀”来源:
功能:
切割方式:
2.DNA连接酶——“分子缝合针”
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