果胶含量的测定方法二.pdf

果胶的测定（方案一） ： 黄晓钰，刘邻渭等．食品化学综合实验 [M] ．中国农业大学出版社 . 2002 ．158~159 实验原理 ：果胶经水解，其产物——半乳糖醛酸可在强酸环境中与咔唑试剂产生缩合反应， 生成紫红色化合物， 其呈色深浅与半乳糖醛酸含量成正比， 由此可进行比色定量 测定果胶。 实验试剂 ： 1.化学纯无水乙醇或 95% 乙醇。 2.精制乙醇：取无水乙醇或 95% 乙醇 1000ml ，加入锌粉 4g ，硫酸（ 1:1）4ml ， 至于衡温水浴中回流 10h，用全玻璃仪器蒸馏，馏出液每 1000ml 加锌粉和氢 氧化钾各 4g ，并进行蒸馏。 3. 0.15%咔唑乙醇溶液：称取咔唑 0.150 g，溶于精制乙醇并定容至 100ml 。 4.半乳糖醛酸标准溶液：先用水配置成浓度 1 g/L 的溶液，再配制成浓度分别为 （0 、10mg/L 、20 mg/L 、30 mg/L 、40 mg/L 、50 mg/L 、60 mg/L 、70mg/L ）的 系列半乳糖醛酸标准溶液。 5.优级纯浓硫酸。 操作方法 ： 1 样品处理： 总果胶提取 ：（鲜样）研磨新鲜样品 50g，放入 1000ml 烧杯中， 加入 0.05mol/L HCl 400mL ，放置沸水浴中加热 1h，加热时应随时补充蒸发损失的水分。冷 却后，移入 500ml 容量瓶，定容摇匀，过滤，滤液待用。（干样）磨细的干 燥样品 5g ，置于 250ml 三角烧瓶，加入 0.05mol/L HCL 150ml ，装上冷凝器， 与沸水浴中加热回流 1h，取出冷却甚至室温，用水定容至 200ml ，摇匀，过 滤，滤液待用。 水溶性果胶提取： 新鲜样品应尽量研磨碎，干燥的样品应磨细后过 60 目筛。 样品中存在有果胶酶时，为了顿化酶的活性，可以加入适量热的 95% 乙醇， 是样品溶液的乙醇最终浓度约为 70% ，然后于沸水浴中沸腾回流 15min，使果 胶酶钝化，冷却过滤后，以 95% 乙醇洗涤多次，再用乙醚洗涤，以除去全部 糖类、脂类及色素，最后风干除去乙醚。 2 果胶提取：水溶性果胶的提取：将样品研碎，新鲜样品标准称取 30~50g ，干 燥样品准确称取 5~10g 至于 250ml 烧杯，加入 150ml 水。加热至沸腾，并保 持此状态 1h 。加热过程随时填补蒸发损失的水分。取出冷却，将杯中物质移 入 250ml 容量瓶，用水洗涤烧杯，洗液并入容量瓶，最终定容至刻度，摇匀 过滤，记录滤液体积。 3 标准曲线制作：取试管 8 支，各加入 12ml 浓硫酸，置冰水浴中冷却后，分别 将各种浓度的半乳糖醛酸 2ml 徐徐各加入试管中，充分混匀后，再置冰水浴 中冷却，然后置沸水浴中加热 10min，迅速冷却至室温，各加入 1ml 0.15% 咔 唑试剂，摇匀，与室温下静置 30min ，用 0 好使观众的溶液调仪器零点，在