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探究“DNA和RNA在细胞中的分布”活动分析 1.实验原理 甲基绿和派洛宁对DNA和RNA的亲和力不同: DNA 绿色; RNA 红色 利用甲基绿、派洛宁混合染色剂可显示DNA和RNA在细胞中的分布。 2.实验流程 固定(蟾蜍血涂片):70%(体积分数)的酒精溶液,10 min ↓ 染色:甲基绿-派洛宁染液,15 min ↓ 冲洗:蒸馏水冲洗1 s~2 s;95%的酒精反复速浸10 s~20 s ↓ 晾干 ↓ 观察:比较染成绿色和红色的部位,得出DNA和RNA的分布规律 3.实验结论:DNA主要分布在细胞核中,RNA主要分 布在细胞质中。 一、实验原理 生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定 的颜色反应。 1.糖类:还原糖+班氏试剂 砖红色沉淀 2.脂肪+苏丹Ⅲ染液→橘黄色(脂肪+苏丹Ⅳ染液→红色) 3.蛋白质+双缩脲试剂→紫色 3.基本技术要求 (1)为了能观察到细胞在生活状态下的内部结构,必须先将细胞固定。 (2)在进行本实验的过程中,与观察植物细胞的有丝分裂一样,所观察的细胞已经被盐酸杀死了,最终在显微镜下看到的是死细胞。 (3)选材的时候必须选用能够进行分裂的分生组织细胞,不分裂的细胞染色体不复制,不会出现染色体加倍的情况。 一、植物细胞质壁分离与复原实验分析 1.质壁分离与复原实验流程 2.质壁分离的原因分析 二、质壁分离实验的拓展应用及方法 1.判断细胞的死活 酶的专一性及影响酶活性条件的实验探究 1.酶的专一性 (1)实验原理 2.温度对酶活性的影响 (1)实验原理 3. pH对酶活性的影响 (1)实验原理 ①2H2O2 2H2O+O2↑ ②pH可影响酶活性,从而影响O2的产生量,根据O2产生量的多少可判断pH对酶活性的影响。 (2)实验程序 绿叶中色素的提取和分离 1.实验原理 (1)叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮(或无水乙醇)中,所以用丙酮可提取叶绿体中的色素。 (2)色素在层析液中溶解度不同,溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得快,溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得慢,因而可用层析液将不同色素进行分离。 2.实验流程 3.基本技术要求 (1)实验成功的关键 ①叶片要新鲜、颜色要深绿。 ②滤液收集后,要及时用棉塞将试管口塞紧,以免滤液挥发。 ③滤液细线不仅要细、直,而且要含有比较多的色素(可以重复画二至三次)。 ④滤纸上的滤液细线不能浸入层析液中。 (2)注意事项 ①制备定性滤纸条时,注意双手尽量不要接触纸面,以免手上的油脂或其它脏物污染滤纸。 ②根据烧杯的高度制备滤纸条,让滤纸条长度高出烧杯1 cm,高出的部分做直角弯折。 ③画滤液细线时,用力要均匀,速度要适中。 ④研磨要迅速、充分。a.因为丙酮有毒且容易挥发;b.为 了使叶绿体完全破裂,从而能提取较多的色素;c.叶绿素 极不稳定,能被活细胞中的叶绿素酶水解而破坏。 ⑤制备滤纸条时,要将滤纸条的一端剪去两角,这样可以 使色素在滤纸条上扩散均匀,便于观察实验结果。 特别提醒:(1)从色素带的宽度可推知色素含量的多少; (2)从色素带的位置可推知色素在层析液中溶解度大小; (3)在滤纸上距离最近的两条色素带是叶绿素a与叶绿素b,距离远的两条色素带是胡萝卜素与叶黄素。 (2)实验操作程序 淀粉酶只能催化淀粉的水解,不能催化蔗糖的水解 结论 无砖红色沉淀 有砖红色沉淀 观察实验结果 7 1 min 1 min 将试管下半部放入热水中加热煮沸 6 2 mL振荡 2 mL振荡 加斐林试剂 5 5 min 5 min 60℃热水保温 4 2 mL振荡 2 mL振荡 注入新鲜的淀粉酶溶液 3 2 mL / 注入蔗糖溶液 2 / 2 mL 注入可溶性淀粉溶液 1 2 1 试 管 项 目 序号 ②温度影响酶的活性,从而影响淀粉的水解,滴加碘液,根据是否出现蓝色及蓝色的深浅来判断酶的活性。 (2)实验设计思路 (3)实验设计程序 特别提醒:本实验不宜选用过氧化氢酶催化H2O2分解,因为过氧化氢酶催化的底物过氧化氢在加热的条件下分解也会加快。 无气泡产生 无气泡产生 有大量气泡产生 观察现象 4 2 mL 2 mL 2 mL 注入等量的H2O2溶液 3 1 mL NaOH 1 mL盐酸 1 mL蒸馏水 注入等量不同pH的溶液 2 2滴 2滴 2滴 注入等量过氧化氢酶溶液 1 试管3 试管2 试管1 实验操作内容 序号 提取色素:称量5 g绿色叶片并剪碎 加入少量SiO2、CaCO3和2 mL丙酮→
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