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植物生理学实验 朱晔荣 赵念席 实验一 植物组织水势测定 一、小液流法测定植物组织水势 二、露点法测定植物叶片水势 纯水的水势(ψw0)最大,ψw0=0,植物细胞的水势都为负值。 水势的单位:帕(Pa)、巴(bar)、大气压(atm)。 1巴 = 0.987 大气压 = 105 Pa=0.1MPa I 小液流法测定植物组织水势 【实验原理】 水总是从水势高处向水势低处流。植物组织间、细胞间、植物体及环境间的水分移动都是由水势决定的。如果将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中,当我们找到某一浓度溶液与植物组织之间水分保持动态平衡,表现出无水分的单向移动,则可以认为植物组织的水势等于此溶液的渗透势。 【实验材料】 土豆 【实验试剂与器材】 实验器材: ⑴试管20支;⑵移液管;⑶毛细滴管;⑷解剖刀;⑸试管架。 实验试剂: ⑴甲烯兰;⑵1M的蔗糖溶液。 【实验步骤】 配制一系列浓度不同的蔗糖溶液,分别是:0.5, 0.4, 0.3, 0.25, 0.20, 0.15, 0.10, 0.05 M各10ml,共8管。注入试管中,各管都加上塞子并编号,按编号顺序排成一列,放在试管架上,作为对照组。 另用8支试管,与前一组试管对应编号,作为试验组,然后由对照组各试管中分别取溶液2ml,移入相同编号组的各试管中,再将各试管加上塞子。 用解剖刀土豆剪成0.2 - 0.5cm大的小块,混合均匀后,向试验组的每个试管中投入10-15块片,加塞并经常摇动,30min后,向试验组的每支试管中加一滴甲烯兰溶液,摇动试管,使溶液均匀着色。 用毛细滴管(或小量程移液管)吸取浸有材料的兰色溶液,然后插入对照组相同编号的试管,在液体的中部轻轻放出一滴兰色试验溶液,仔细观察液滴移动的方向,并记录之。 II 露点法测定植物叶片水势 【实验原理】 将叶片或组织汁液密闭在体积很小的样品室内,经一定时间后,样品室内的空气和植物样品将达到温度和水势的平衡状态。此时,气体的水势(以蒸气压表示)与叶片的水势(或组织汁液的渗透势)相等。因此,只要测出样品室内空气的蒸气压,便可得知植物组织的水势(或汁液的渗透势)。由于空气的蒸气压与其露点温度具有严格的定量关系,本仪器便通过测定样品室内空气的露点温度而得知其蒸气压。 1. 样品的准备 把样品放入样品杯,尽可能覆盖杯的底部。WP4可以测量没有完全覆盖的样品,但是大的样品表面积可以加速测量、提高效率(填充不要超过半杯。过满的样品有可能污染传感器)。 2. 测量 (1)把样品室旋钮调至OPEN/LOAD档并打开样品室。 (2)放入样品。检查杯子的边缘,确定没有样品残留。 (3)小心关闭样品室,尤其是液体样品。 (4)按右下角按钮,观察样品与样品室间温度差异。 (5)把样品室旋钮调至READ 档,密封样品室。仪器出现哔哔声一次,并且绿色灯闪烁,表明测量开始。 【思考与作业】 植物组织切块的大小和数量对组织水势的测定结果是否有影响? 加入甲烯兰溶液会影响实验结果吗?为什么? 该实验具体操作中应该注意的事项主要有哪些? * * 植物生物学实验-植物生理部分 液滴移动的方向 0.5 0.4 0.3 0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 溶液浓度/M 【结果计算】 ↑ ↑ ↑ - ↓ ↓ 小液流方向 0.4 0.5 0.3 0.2 0.1 0.05 糖液浓度(M) Ψw = -iCRT = -0.0083×(273+toC) ×0.2 Ψw为渗透势,单位为Mpa; i 为解离系数,蔗糖为1(无量纲); C 为溶液的浓度,单位为mol/L; R 为摩尔气体常数,为0.0083 L·MPa / (mol·K); T 为热力学温度,即273+toC,单位K 。 WP4利用位于样品上方密闭容器中的冷镜测量水蒸气的露点。样品的温度则通过内置的红外温度计测量。 【实验内容与步骤】
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