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3 干燥保藏法 基本原理:将微生物赖以生存的水分蒸发掉,使细胞处于休眠和代谢停滞状态,从而达到较长期保藏的目的。低温条件下,保藏期可达数年至十几年之久。 砂土管保藏法、明胶片保藏法、硅胶保藏法、麸皮保藏法 砂土管保藏法—产生芽孢的细菌及形成孢子的霉菌和放线菌。 方法:处理砂土 装沙土管 制备菌液 加孢子液 干燥 收藏 恢复培养 明胶片保藏法—细菌 制备菌悬液 制备菌液 制备蜡纸 加菌液 干燥 收藏 恢复培养 3干燥保藏法 硅胶保藏法—丝状真菌。 方法:制备硅胶 制备菌液 加菌液 干燥 收藏 恢复培养 麸皮保藏法—产孢子的丝状真菌。 制备麸皮培养基 培养菌种 干燥 收藏 恢复培养 3干燥保藏法 4冷冻真空干燥保藏法 该法集中了菌种保藏中低温、缺氧、干燥和添加保护剂等多种有利条件,是微生物代谢处于相对静止状态。 该法可同时用于细菌、放线菌、丝状真菌、(除少数不产孢子或只产生丝状体真菌外)、酵母菌及病毒的保藏。 该方法保藏菌种范围广、保藏时间长(一般可达10~20年),存活率高,是目前最有效的菌种保藏方法之一。 4冷冻真空干燥保藏法 安瓿管 5液氮超低温保藏法 将菌种保藏在超低温(-196℃~-150 ℃ )的液氮中,可降低变异率和长期保持原种的性状。 对于冷冻干燥保藏法或其他干燥保藏有困难的微生物,如支原体、衣原体及难以形成孢子的小霉小型藻类或原生动物都可用本法长期保存,这是当前保藏菌种最理想的方法。 保护剂:20%甘油或10%二甲基亚砜(DMSO) 常见病原菌的灭菌、抑菌、保藏原理及方法 消毒灭菌 基本概念 消毒(disinfection):杀死物体上或环境中的病原微 生物,并不一定杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。 灭菌(sterilization):杀死 物体上所有微生物的方法(包括芽孢)。 一、消毒灭菌的方法 常用的消毒和灭菌方法可分为: 1)物理方法: 热力灭菌法 辐射杀菌法 滤过除菌法 干燥与低温抑菌法 2)化学方法 3)生物灭菌法 热力灭菌 原理: 破坏菌体蛋白质与核酸,使其肽链断裂,蛋白质 变性凝固,核酸解链崩解, 导致细菌死亡。 火焰灼烧 干热灭菌法 烘箱热空气灭菌 LIH法 高温灭菌 巴氏消毒 HTST法 常压 下 煮沸消毒 间歇灭菌 湿热灭菌消毒法 常规加压灭菌 加压 连续加压灭菌法 种类: 常用热力灭菌法 种类 方法 效果 用途 干 热 焚烧 用焚烧炉燃烧 灭菌 废弃污物、尸体 烧灼 火焰烧灼 灭菌 接种环,试管口 干烤 红外线 干烤箱,热空气 160-170oC 2h 电磁波热效应 灭菌 灭菌 玻璃器皿等耐高温的物品 医疗器械 湿 热 煮沸法 100oC,5-10分钟,沸水 消毒 饮水和食具 高压蒸气灭菌法 高压蒸气灭菌器 103.4Kpa 121.3oC×15-20分钟 灭菌 耐高温 耐湿物品 辐射杀菌法 紫外线( ultraviolet ray,UV) ?: 260nm-266nm(最佳杀菌波长) 杀菌原理:使DNA上相邻的T碱基通过共价键结合成 二聚 体,干扰DNA复制与
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