第三章提取分离方法.ppt

4.天然药物有效成分的分离纯化方法 4.2 层析法 （色谱法、色层法，Chromatography） chromato：色 graphy：记录方法 1906年 层析法问世 俄罗斯植物学家茨维特（Tswett）用液固吸附 层析分离了植物色素 层析法是利用不同化合物在互不相溶的两相中的亲和力的不同来分离物质的一种方法。 4.2 层析法 （色谱法、色层法，Chromatography） 4.2.1 层析法的分类 1）根据两相的状态划分 ⊙ 液相层析法 (liquid chromatography，LC) * 液-固层析法 (liquid-solid chromatography) * 液-液层析法 (liquid-liquid chromatography) * 胶束电动色谱(micellar electrokinetic chromatogranphy) ⊙ 气相层析法 (gas chromatography，GC) * 气-固层析法 (gas-solid chromatography) * 气-液层析法 (gas-liquid chromatography) ⊙ 超临界流体层析法 (supercritical fluid chromatography，SFC) 4.2.1 层析法的分类 2）根据固定相使用的形式划分 柱层析法 (column chromatography) 薄层层析法 (thin-layer chromatography) 纸层析法 (paper chromatography) 逆流层析法 (counter current chromatography) 4.2.1 层析法的分类 3）根据层析过程的机理划分 吸附层析法 (adsorption chromatography) 分配层析法 (partition chromatography) 尺寸排阻层析法 (size-exclusion chromatography) * 分子筛过滤法 (molecular sieve filtration) * 凝胶过滤法 (gel filtration) * 凝胶渗透层析法 (gel permeation chromatography) 离子交换层析法 (ion-exchange chromatography) 亲和色谱法（affinity chromatography） 4.2 层析法 （色谱法、色层法，Chromatography） 4.2.2 吸附层析法（adsorption chromatography) 1）吸附作用 * 物理吸附 (physical adsorption) : 分子间作用力 * 化学吸附 (chemical adsorption) * 半化学吸附 (semi-chemical adsorption) ：氢键作用 2）物理吸附基本规律----相似者易于吸附 4.2.2 吸附层析法 2）物理吸附基本规律----相似者易于吸附 ② 溶剂的极性强弱: 介电常数 ③ 常用的固定相吸附剂 无机吸附剂: 硅胶、氧化铝、活性炭 等 有机吸附剂: 聚酰胺、大孔吸附树脂等 4.2.2 吸附层析法 4）常用的吸附层析法 ① 硅胶（silica gel）层析 硅胶G，硅胶H，硅胶GF254，硅胶HF254 硅胶HF254＋365，硅胶CMC，硅胶60 ★ 硅胶的吸附性能取决于： a. 硅羟基的数目 b. 含水量: 12%时吸附力极弱 c. 硅胶的表面积、表面结构、微孔体积、微孔半径等 4.2.2 吸附层析法 4）常用的吸附层析法 ① 硅胶层析 ★ 硅胶层析的应用 ：酸性或中性化合物 ★ 硅胶柱层析法的使用方法 ● 层析硅胶的用量 ● 层析柱的制备与加样 ● 层析溶剂的选择 ：TLC; 洗脱顺序（正相色谱） ● 硅胶的再生 ② 氧化铝（alumina）层析 碱性化合物的分离，如：生物碱 4.2.2 吸附层析法 ③ 活性炭（active carbon）层析 ● 非极性吸附剂 ● 水溶液中吸附力最强，有机溶剂中较弱 ★ 对不同化合物的吸附力大小： ◎ 极性基团多的化合物 ＞