生化制药学-生化药物.doc

本科药学第二学期《生化制药学-生化药物》 生化制药学试卷1 一 名词解释（每小题4分，共20分）： 1. 超滤 2. 离心沉降系数 3. 酶单位 4. 核酸类药物 5. 糖胺聚糖 二 简答（每小题10分，共50分）： 1.简述有机溶剂分级沉淀的基本原理。 2. 蛋白质的颜色反应有哪些？ 3. 简述肝素的临床应用。 4. 简述鱼油多不饱和脂肪酸EPA和DHA的药理作用。 5. 简述定磷法测定RNA含量的基本原理。 三 论述（每小题15分，共30分）： 1. 试述糖胺聚糖的提取方法和原理。 2. 什么是蛋白质的沉淀？简述蛋白质沉淀的几种方法和条件。 山东大学生化制药学试卷1标准答案 一．名词解释 1. 在一定压力下，使用一种特制的半透膜（不同分子量的截留膜）对混合物中不同分子进行选择性过滤而分离方法。膜上的小分子物质可以通过，而大分子物质受阻截留在膜的表面。 2. 指单位离心力作用下粒子的沉降速度。 3. 酶的1个活力单位是在该酶的最适条件下，在25℃，1分钟内催化lμmol 4.核酸类药物是指具有药用价值的核酸、核苷酸、核苷、碱基以及它们的类似物和衍生物。 5. 动物来源的含有氨基己糖（己糖胺）的多糖总称为糖胺聚糖。糖胺聚糖多是含有糖醛酸和氨基糖残基的多糖。 二 简答 1. 加入有机溶剂一是降低了溶液的介电常数，使物质的溶解度降低；二是破坏了两性电解质的水化膜，从而产生沉淀。 2. （1）茚三酮反应蛋白质和茚三酮混合加热，反应呈现蓝紫色。（2）双缩脲反应 蛋白质在碱性溶液中可与Cu2+产生紫红色反应。（3）酚试剂反应 在碱性条件下蛋白质分子中的酪氨酸色氨酸可与酚试剂反应呈现蓝色。 3. 肝素是需要迅速达到抗凝作用的首选药物，也可用于外科预防血栓形成及妊娠者的抗凝治疗，对于静脉或皮下注射给与肝素适当的剂量，使病人开始即能迅速达到低凝状态。对于急性心肌梗死患者可用其预防病人发生静脉血栓栓塞病，并可预防大块的前壁透壁性心肌梗死病人发生动脉栓塞。还可以用于心脏手术和肾脏透析时维持血液体外循环畅通。还用于治疗各种原因引起的弥散性血管内凝血，也用于治疗肾小球肾炎、肾病综合征、类风湿性关节炎等。 4. （1） 调血脂，(2)抗血小板聚集，(3)改善血液流变学，(4)扩张血管，(5)改善末梢循环，(6)抗炎作用，(7)延长凝血时间，(8)改善大脑功能，促进记忆。 5. 此法首先必须将RNA 中的磷水解成无机磷。常用浓硫酸或过氯酸将RNA消化，使其中的磷转变成正磷酸。正磷酸在酸性条件下与钼酸作用生成磷钼酸，后者在还原剂（如抗坏血酸等）存在下，立即还原成钼蓝。钼蓝的最大光吸收在660nm处，在一定浓度范围内，溶液在该处的光密度和磷的含量成正比，从而可通过测光吸收度，用标准曲线算出样品的含磷量。根据对RNA和DNA的分析，已知前者的磷含量为9.4％，后者的为9.9％，于是可从磷含量推算出核酸的含量。 三 论述 1. （1）非降解法：非降解法是指用水或盐溶液从动物组织中提取粘多糖的方法。此法适用于与其他组织结构联接不牢固的粘多糖或其蛋白复合物的提取，如从玻璃体、脐带、关节滑液中提取玻璃酸。用本法提取的粘多糖仍结合有蛋白质，需用酶解等方法去除。 （2）降解法：①碱处理法：用碱处理的方法可以从组织中对粘多糖进行较完全的提取。例如，已经成功他用此法从软骨中提取硫酸软骨素。此法的缺点是，粘多糖分子有从裂解的一端被碱进一步降解的可能。所以如果希望药物成分在特定的范围内保持分子完整，则不宜用此法，或尽可能地使用稀碱并避免高温。为了避免在碱处理时可能发生的一些糖苷键的断裂，用碱提取可以在硼氢化物存在下进行，硼氢化物可使木糖残基还原为木糖醇，因而能成功地阻止进一步降解。 ②酶处理法：用蛋白酶消化，是常用的从组织中释出粘多糖的方法之一。通常选用专一性低的蛋白酶，以进行广泛的蛋白质水解。常用的有胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、链霉蛋白酶、糜蛋白酶等。从组织中释出粘多糖，有时选用含有多种酶类的混合酶更具有优越性。如用胰酶或胰脏，它们含有胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等多种酶类，不仅具有水解蛋白质的广谱性，而且还可水解脂肪使提取易于操作，水解糖原等以减轻对粘多糖的污染。 2. 蛋白质分子聚集而从溶液中析出的现象，称为蛋白质的沉淀。蛋白质沉淀反应是蛋白质提取、分离不可缺少的手段。在蛋白质的沉淀反应中根据需要通过控制沉淀条件可以得到变性或不变性的蛋白质。 (1) 中性蛋白质沉淀反应 在溶液中加入中性盐即正盐而使蛋白质沉淀的现象，称为盐析。中性盐对于蛋白质的作用有两个方面。低浓度的个性盐离子减少蛋白质分子之间静电引力，增加蛋白质和溶剂的相互作用力而增加溶解度，这—现象称为盐溶。但随着中性盐浓度的增加，蛋白质表面的电荷大量被中和，最后破坏蛋白质表面的水化膜，促使蛋