二氮嗪对H2O2损伤大鼠L6骨骼肌成细胞的作用与机制分析.pdfVIP

中文摘要 的影响，摸索LY294002的适当浓度。 3DZ预处理对H202损伤L6SkM的作用体外培养L6SkM。实验分 正常对照组(normal contr01)，H202损伤组(H202 的培养基作用24小时)，DZ预处理组(在培养基中先加入终浓度为 2001maol／L二氮嗪的同时加入终浓度50 比色法检测各组细胞活性：HE染色观察细胞的形态学变化；激光共聚焦 显微镜观察各组细胞经JC．1染色的线粒体膜电位的变化。免疫细胞化学 结果： 及时间的增加细胞活力逐渐下降，我们选择引起细胞活力下降50％左右 的H202浓度0．40mmol／L作用24小时建立损伤模型。 无差异。 3流式细胞仪检测细胞凋亡率：与正常组比较，H202组的细胞凋亡率明显 11．53士0．25％；LY组的细胞凋亡率升高至31．95士2．06％但低于H202组。 4激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位的荧光变化：正常细胞具有较高的 膜电位，当细胞发生凋亡时，线粒体膜电位发生去极化。经JC．1染色后， 正常细胞发出较强的红色荧光，绿光相对较弱，细胞凋亡时绿色荧光增强， 红光减弱，用绿／红荧光强度比的变化说明线粒体膜电位的改变。结果显 示与正常组比较，H202组绿／红荧光强度比增大，线粒体膜电位降低；DZ 预处理，绿／红荧光强度比降低与正常组接近，能很好的维持细胞的膜电 中文摘要 位；LY组绿／红荧光强度比升高与H202组接近，膜电位降低。 组，两组存在差异。 6Westem．blot法检测结果 6．1 蛋白表达与DZ组相比明显降低，且与H202组无差异。 6．2 结论： 1二氮嗪预处理能够改善细胞形态、增加细胞存活率、提高线粒体膜 电位水平及抑制凋亡，对氧化应激损伤L6SkM具有保护作用。 2二氮嗪预处理的保护作用是通过激活了P13K／Akt信号通路，下调 凋亡蛋白caspase．3，9的从而抑制细胞凋亡，促进细胞存活。 关键词：二氮嗪；P．Akt；Caspase一3；预处理；凋亡 英文摘要 MechanismandEffectionon L6Skeletal The H202一Injuried ofDiazoxide Preconditioning Myoblastby ABSTRACT heartdisease ofischemic our theincidence ectives：In obj country themaincausesof increased ithasbecometheoneof yearbyyear．and made heartdiseasehas human thetreatmentofischemic death．Nowadays cell thetreatmenteffectisrestricted greatprogressby transplantation，but