课件:HIV抗体初筛试验.ppt

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接收样本时,必须填写样本接收记录单 建立样本的唯一性编码 登记有关信息 受检者姓名、性别、年龄、职业、 送检单位、人群类别、检验结果、 送检日期、报告日期 样本的接收 样本的接收 认真核对样本与送检单提供的信息是否相符、样本有无破损和渗漏。如发现渗漏的,立即将尚存的样本移出,对样本管及包装进行消毒,同时报告主管领导和有关专家 检查样本的物理性状。并做好记录。如果样本不符合试验的要求,应将样本安全废弃,同时立即通知送样人 样本的接收 实验室工作人员在打开样本容器时,须小心,防止内容物崩溅。样本处理时,须穿戴防护衣,在生物安全柜中操作,同时应戴一次性口罩、防护眼镜,防止皮肤、粘膜污染。用后的包装要进行消毒 检测方法 必须按照试剂盒说明书(sop)中规定的要求进行操作 包括进行检测的实验条件如阳性对照和阴性对照的设置、试剂、标本加样量、孵育时间、反应温度、洗涤程序和次数等 标本质量 冷冻样品实验前需解冻并混匀,血清或血浆样品如溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况,可能会对试验产生影响 加样 移液器 ( 包括单头和多头移液器 ) 是实验室中重要的基本器具,一年至少校准一次 准确加到微孔板底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡,加入后及时放入孵箱 检测方法 检测方法 孵育 孵育的温度要控制好,时间要掌握好,严格按照说明书操作 注意封板,避免蒸发 反应板不宜叠放,反应板至水面下的1/3处,以保证各板的温度都能迅速平衡,保证温度的均一性 检测方法 洗涤 各种试剂盒的洗液不要混用。按要求稀释,洗液如果结晶应待其融解后配制 检查洗板机管道是否通畅,是否有漏液现象 按孔的大小调节好洗液的量 孔内液体被洗板机吸收得越干净洗涤效果更好,手工洗板防止洗液在孔内形成气泡 检测方法 显色与终止 显色剂不用过期显色剂 加终止液时应避免产生气泡。如产生较多气泡,则会导致假阳性 酶标仪测定 每天(每次) 核对酶标仪滤光片波长 查洗板机管道是否通畅,是否有漏液现象 每周 清洁仪器表面,保护光学零件,不沾灰尘 每月 洗涤时检查各孔是否与相应的冲洗头对位良好,负压是否符合规定要求,这是保证各孔洗涤均衡一致的前提 ℃ ℃ ℃ ELISA 洗板机与酶标仪 (推荐方法) 结果报告 分析结果及发出检测报告前,应在试剂盒和外部质控品结果满足要求的前提下,对样品进行分析,试剂盒及外部质控品不合格,样品需要重新检测,复核人对检测结果进行仔细复核并对结果提出结论,签发人对试验结论进行审核、分析、总结、签字 结果报告 筛查阴性样本,出具具有法律效用的正式报告,血清建议保存1-2个月 筛查阳性样本,及时送确证实验室。必要时可出具HIV抗体待复查报告 筛查实验室不得保存阳性样本,需转运至确认实验室 筛查实验室不可以出具HIV抗体阳性报告 结束语 严谨的设计,优质的试剂,正确的操作和良好的仪器是保证ELISA必要条件 严格遵照规定操作,必能得出准确的结果 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 可编辑 可编辑 HIV抗体筛查试验 山西医科大学第二医院检验科 郭先锋 HIV抗体检测的目的和要点 目的 诊断 血液筛查 监测 要点 根据目的选择检测方法及检测策略 ! 严格遵守实验室SOP 筛查试验阳性—需做确证试验 筛查试验阴性—不应做确认试验 筛查及确证试验均应做好咨询工作 HIV抗体筛查试验 试剂 储存温度 效期 样品 血清 血浆 全血 方法 酶联免疫吸附试验(ELISA 化学发光或免疫荧光实验 快速检测(RT)及其它检测试验 明胶颗粒凝集试验 (PA) 免疫渗滤试验 免疫层析试验 免疫胶体金法(硒) 免疫胶体金法 阴性 质控区(C)出现红色反应线 阳性 质控区(C)出现红色反应线 检测区(T)出现红色反应线 无效 质控区 (C)未出现红色反应线 HIV抗体筛查试验 HIV抗体筛查试验 酶联免疫吸附试验(E

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