实验二细菌的人工培养与消毒灭菌.ppt

医学微生物学实验 Experiment of Medical Microbiology 实验二 细菌的人工培养与消毒灭菌 Artificial culture of bacteria ,Disinfection and sterilization 【目的要求】 1.了解细菌人工培养的方法和过程。 2.熟悉常用的消毒灭菌方法、仪器设备、使用注意事项等。 3.掌握细菌在各种培养基的生长现象,细菌菌落的概念,熟悉细菌菌落的特点。 4.熟悉细菌生化反应的原理和结果。 【实验内容】 一、录像 1．细菌的人工培养（P212） 2．消毒灭菌 二、细菌培养物观察(示教)（P237） 1．液体培养物观察 2．固体培养基观察 三、细菌的生化反应(示教) （P248） 二、细菌培养物观察(示教) 1．细菌在液体培养基中的生长现象 （1）葡萄球菌——混浊生长 （2）枯草杆菌——表面生长 （3）乙型链球菌——沉淀生长 混浊生长 表面生长 沉淀生长(右) 注意：观察时请不要摇动试管 2.细菌在固体培养基上的生长现象 (1)在琼脂斜面的生长现象 菌苔 菌落: 单个细菌在琼脂平板上生长繁殖后形成的细菌集群。 特点： （1）肉眼可见； （2）遗传背景相同（纯细菌）； （3）不同细菌形成的菌落其形态不同（助于鉴别细菌）。 （4）计数活的细菌 （菌落形成单位，colony forming unit,CFU/ml) （2）在琼脂平板的生长现象 Nature 2008: 454;595-599 . Science 2007:318(5850);652 - 655 进展: 生物膜 葡萄球菌、枯草杆菌、乙型溶血性链球菌菌落特征观察： 注意：不要打开平板 菌落观察： 菌种 大小 形态 表面 边缘 透明度 颜色 溶血环 (血平板) 凹凸 光滑或粗糙 干湿 葡萄球菌 枯草杆菌 溶血性链球菌 菌落观察结果记录： 葡萄球菌、枯草杆菌、乙型溶血性链球菌的菌落特征 三、细菌的生化反应(示教) 1.单糖发酵试验 _ + ⊕ 产硷杆菌 葡萄球菌 大肠杆菌 2.硫化氢试验 醋酸铅培养基，接种针穿刺接种 结果： 变形杆菌+ 大肠杆菌- 3.靛基质试验(吲哚试验) 加5~10滴靛基质试剂（柯氏试剂) 轻轻摇动后，静置观察。 方法: 结果判断： 若培养基表面出现玫瑰红色液体为阳性，记录为（+）；如培养基表面呈黄色为阴性，记录为（–）。 结果： 大肠杆菌+，产气杆菌 - 【实验报告内容】 记录观察结果： 1.细菌在液体培养基中的生长现象，画图; 2.菌落特征记录; 3.细菌的生化反应结果，画图。 请班干部 填写实验运行记录， 安排做好清洁卫 谢谢！