组织芯片 and 细胞芯片.pptx

组 织 芯 片组织芯片的概念 组织芯片(tissue chip) 又称组织微阵列(tissue microarray，TMA) 技术, 是由Kononen 等于1998 年首先建立并报道, 一般是将数十至上百个甚至更多小的组织整齐有序地排列在一张载玻片上而制成缩微组织芯片, 即组织切片。 组织芯片的概念组织芯片的制备组织芯片的制备样本的代表性问题肿瘤的异质性（ 即在同一常规切片中肿瘤组织学类型不一，分化程度迥异）常常影响人们对肿瘤的诊断与评估同一组织取材大小及数目应该代表组织的典型病变，这可以通过多点穿孔取材加以克服。到底需要打多少个孔？组织芯片研究方法HE染色 HE染色又称苏木素-伊红染色法，是普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死的一种染色方法。组织芯片研究方法免疫组织化学 免疫组织化学（Immunohistochemistry，IHC）是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学＋抗原抗原 – 抗体复合物抗体抗原与抗体之间的结合具有高度特异性组织芯片研究方法免疫组织化学技术包括： 一、免疫荧光技术 二、免疫酶技术 三、亲合素-生物素技术 四、免疫胶体金技术组织芯片技术的应用一、在药物发现中的应用在新药研发过程中, 检测组织中新药靶基因的表达有助于新药发现在新药临床前安全评价研究中, 实验所用的动物数量多, 并要求采集多种动物脏器组织芯片技术的应用二、组织芯片在肿瘤研究的应用组织芯片在肿瘤诊断中的应用肿瘤的早期诊断是医学研究的重点例：应用组织芯片技术研究人类胰腺癌中钙结合蛋白表达的生物学意义组织芯片技术的应用目的探讨钙结合蛋白在胰腺癌中的表达及生物学意义方法 用组织微阵列技术构建包含51例胰腺癌, 6例慢性胰腺炎患者, 3例正常胰腺组织的60点阵的石蜡组织芯片。用免疫组化SP法检测该芯片中钙结合蛋白的表达, 分析其与胰腺癌临床病理因素的关系。组织芯片技术的应用钙周期蛋白与胰腺癌发生、 发展有密切关系, 胰腺癌早期即发现有钙周期蛋白表达, 对胰腺癌的早期诊断有益组织芯片技术的应用2.组织芯片在肿瘤分类中的应用不同分类的肿瘤由于其组织学类型和肿瘤细胞功能状态及其特异性受体的不同, 治疗方案、疗效及预后均不同。例：组织芯片用于乳腺癌分类组织芯片技术的应用方法将97例病人的乳腺癌组织制成组织芯片对肿瘤进行分型（ER-negative and ER-positive）利用组织芯片技术分析乳腺癌雌激素受体 (ER) 、血管内皮生长因子 (VEGF) 、环氧化酶2、p53、血小板源性生长因子、c-erbB2及PR等7种肿瘤标志物免疫组织化学表达谱目的指导不同类型乳腺癌的个体化治疗及判断预后等方面Tissue microarray (TMA) for immunohistochemical analysisDifferential expression of seven biomarkers in ER-negative (A) and ER-positive groups (B)组织芯片技术的应用3.组织芯片在肿瘤的浸润转移研究中的应用例：KAI1/CD82蛋白表达与肝细胞癌侵袭转移组织芯片技术的应用方法收集肝细胞癌及癌旁肝组织155例，癌栓22例，肝内转移癌4例，肝外转移癌16例构建肝癌组织芯片应用免疫组织化学方法检测肝癌组织芯片中样本KAI1/CD82蛋白的表达组织芯片技术的应用肝癌组织芯片组织芯片技术的应用肝细胞癌，KAI1/CD82蛋白弱阳性表达，肿瘤细胞胞质出现淡黄色颗粒癌旁肝组织，KAI1/CD82蛋白强阳性表达，肝细胞胞质出现棕黄色颗粒 结果：不伴有肝外转移、肝内转移肝细胞癌中KAI1/CD82蛋白表达率分别高于伴有肝外转移、肝内转移者组织芯片技术的应用4.组织芯片在肿瘤临床治疗研究中的指导作用目的：运用免疫组化方法检测60份淋巴瘤标本制成的组织芯片中穿孔素、颗粒酶B的表达和分布情况结果：42份B细胞淋巴瘤的瘤细胞均不表达穿孔素和颗粒酶B。10份外周T细胞淋巴瘤中8份表达穿孔素,9份表达颗粒酶B,阳性表达细胞均为非肿瘤细胞。结论：穿孔素和颗粒酶B是鉴定活化的细胞毒性细胞的免疫标志物, 可作为 NK/T细胞淋巴瘤的诊断性标志物组织芯片技术的应用5.在临床肿瘤预后判断中的研究在判断肿瘤预后研究中, 组织芯片在寻找筛选预后判断标志物的过程中起重要作用。组织芯片技术的应用三、组织芯片在形态学教学中的应用组织胚胎学及病理学等形态教学是医学生教学中的基础教学传统制片方法耗时、 费力、 费资源，制出来的切片, 并不是每张切片上都有典型病变, 这对学生的学习非常不利。组织芯片技术的应用四、组织芯