细胞实验学生实验守则课件.ppt

2.0 .50 .12 .00 4.0 8.0 2.0 1.0 0.5 .25 .12 .00 4 2 6 激动素 浓度（mg·L-1 ） 吲哚乙酸 浓度（mg·L-1 ） ①KT浓度高于IAA，形成芽，不形成根。 ② KT浓度大体相等IAA，形成愈伤组织，不发生器官。 ③ IAA浓度高于KT，分化根，不形成芽。 离体培养光照控制分阶段进行。 5 光照对器官分化的影响 时间 强度 光质 离体培养光照控制分阶段进行 黑暗或弱散射光 诱导培养 利于愈伤组织形成 分化阶段 较强光照，14~16h 利于微管组织形成，极性建立，形态发生 总结 离体培养对植物细胞工程的重要性 工 程 胞 细 物 植 基因工程 花粉花药培养 离体保存 人工种子 细胞杂交 原生质体培养 组织培养 细胞培养 离体快繁 离体 培养 细胞全能性与形态发生 一 植物细胞工程概念及其应用 1 植物细胞工程概念 以植物细胞为基本单位，在离体条件下进行培养、繁殖或精细操作，使细胞的生物学特性按人们的意愿发生改变，从而改良品种或创造新物种，或加速繁殖植物个体，或获得有用物质。 与植物组织培养的关系 2 植物细胞工程类别 组织与细胞培养 细胞融合 胚胎工程 染色体工程 基因工程 根据技术策略 植株培养 器官培养 胚胎培养 愈伤组织培养 细胞培养 根据培养层次 原生质体培养 3 植物细胞工程应用 快速获得特殊倍性材料 克服远缘杂交不亲和 导入外源基因 突变体筛选 种质资源保存 A 在植物育种上的应用 B 种苗脱毒与快速繁殖 C 细胞培养生产有用次生物 D 基础研究中应用 植物细胞全能性及其表达 一个细胞所具有的产生完整有机体的潜能或特性。 1 全能性 二 大多数已分化植物细胞具有恢复分生状态的潜能，少数失去全能性。 2 全能性差异 规律I ？ ？ 周期细胞 终端分化细胞 G0细胞 形成层细胞 筛管细胞 导管（细胞） 气孔保卫细胞 薄壁细胞 ? 周期细胞 终端分化细胞 G0细胞 形成层细胞 筛管细胞 导管（细胞） 气孔保卫细胞 薄壁细胞 规律II 离生长中心越远，分化程度越高，向分生状态恢复的可能性 ? 不同类型植物细胞向分生状态回复的可能程度 营养生长中心 形成层 薄壁细胞 伴胞及分泌细胞 厚壁细胞木质化细胞 纤维细胞 退化细胞如筛管 3 培养条件下的细胞脱分化 脱分化：已分化细胞回复到无分化状态 G0细胞 外界 刺激 基因 选择性 表达 脱分化细胞 ? G0细胞 导致细胞分裂 细胞脱分化 几次无丝分裂 有丝分裂 细胞 细胞团 胚性细胞 愈伤组织 体细胞胚 概念 细胞团 愈伤组织 愈伤组织 愈伤组织 愈伤组织 胚性细胞 能分裂分化出其他组织或或完整植株的细胞。类似于动物胚胎干细胞概念。 自然条件下 三类胚性细胞 早期胚胎细胞 茎端分生细胞 成熟组织中存留的胚性细胞 圣兰 早期胚胎细胞 落地生根叶周缘一些特定部位细胞 小麦种子胚 大豆种子胚 茎端分生细胞 4 细胞分化 A 染色体和基因与细胞分化 B 极性与细胞分化 C TE细胞与细胞分化 A 激素在细胞分化中的调控作用 极性与细胞分化 植物的器官、组织、单个细胞在不同的轴向上存在的形态结构及生理生化上的梯度差异。 没有极性就没有细胞分化。 细胞不均等分裂是细胞极性建立的标志。 红背桂 Excoecaria cochinchinensis 叶盘方向对出愈率的影响 材料 Materials 出愈率(%) Induction rate of callus 正面朝上 Cultured upside up 背面朝上 Cultured upside down 光叶子花 64.3±7.4 82.8±9.8 月季花 0.3±0.1 94.4±5.7 大豆 67.1±9.3 84.7±11.1 豌豆 60.5±8.6 75.1±8.2 茉莉 56.7±7.1 90.0±6.8 极性 光叶子花 月季花 大豆 豌豆 茉莉 叶盘方向对愈伤组织生长的影响 材料 Materials 愈伤组织直径(mm) Callus diameter 生长5天 Grow for 5 days 生长10天 Grow for 10 days Cultured upside up Cultured upside down Cultured upside up Cultured upside down 光叶子花B glabra 1.13±0.21 1.08±0.19 2.06±0.40 1.93±0.41 月季花R chinensis 0.27±0.04 0.66±0.13 0.52±0.14 1.24±0.28 大豆 G max 0.86±0.15 1.92±0.35 1.85±0.19 2.74±0.42 豌豆P sativum 0