安图ORCH抗体亲和力检测.ppt

抗体亲和力检测方法 通过解离剂将低亲和力抗体解离掉。 通过中和抗原将高亲和力抗体中和掉。 国内获得批准文号的产品及方法 厂家及项目名称 安图 DiaSorin Roche Abbott Biomerieux CMV-IgG AVI ELISA 化学发光 电化学发光 化学发光 ELISA荧光 RV-IgG AVI ELISA / / / / TOX-IgG AVI ELISA 化学发光 电化学发光 化学发光 ELISA荧光 HSV-1IgG ELISA / / / / HSV-2IgG ELISA / / 2012年以后批准上市 国外批准上市的主要厂家及方法 巨细胞病毒亲和力试剂盒检测结果比较 安图标杆 Radim、Euroimmun与临床的符合率优于其他厂家，安图产品研发以Radim为参比试剂盒。 弓形虫亲和力试剂盒检测结果比较 各厂家检测结果差异不大 低亲和力结果可能不是急性感染 高亲和力结果可以排除急性感染 第一个国产TORCH五项抗体亲和力检测试剂盒（2013年获得批准文号） 国家十二五规划 863课题项目之一 产品设计兼顾IgG检测灵敏度和高值样本OD值不超限 产品原理：解离剂法 产品方法：ELISA 样本稀释： 1/100孔外稀释 反应模式：30分钟-10分钟-30分钟-10分钟 加样量： 稀释后样本、对照缓冲液、解离缓冲液、酶结合物均100ul/孔。 波长设置： 450/620nm双波长读数，如果样本OD值3.0，用405/620nm双 波长读数。 结果计算：亲和力指数=解离缓冲液孔OD值/对照缓冲液孔 OD值×100% 安图TORCH抗体亲和力检测试剂盒 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A ○QL ○S3 ○S7 A B ○QL ○S3 ○S7 B C ○QH ○S4 C D ○QH ○S4 D E ○S1 ○S5 E F ○S1 ○S5 F G ○S2 ○S6 G H ○S2 ○S6 H 加样模式 BIOMEX血清转化盘48份样本的亲和力与 感染时间的关系 BIOMEX 48份血清转化盘的感染时间小于80天，其中33份样本为IgG阳性，均为低亲和力，灵敏度为100%。 RV血清转化盘 图1：安图试剂盒CMV-IgG抗体亲和力水平随感染时间的变化 图2：Abbott ATCHIT试剂盒CMV-IgG抗体亲和力水平随感染时间的变化 CMV血清转化盘 安图试剂盒在感染100天后检测基本为高亲和力 Abbott ATCHIT试剂盒在感染后120天仍为低亲和力。 IgG + IgM - 既往感染样本评价 项目名称 总样本数量 高亲和力 灰区 低亲和力 特异性 CMV-AVI 744 708 17 19 97.4% RV-AVI 978 968 0 10 98.98% TOX-AVI 228 214 9 5 97.7% HSV1-AVI 587 576 6 5 99.1% HSV2-AVI 388 376 5 7 98.2% 共同推进TORCH检测的规范化 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 学术上有两个学说来解释这个问题，他们都认为机体受到抗原刺激后产生抗体并不是一蹴而就的，它需要一个产生过程和筛选过程 抗体的亲和力成熟的过程 * 在初次免疫应答时，大量抗原可激活表达不同亲和力BCR的B细胞，而这些B细胞大多数产生低亲和力抗体，当大量抗原被清除或再次免疫应答仅有少量抗原出现时，表达高亲和力BCR的B细胞会优先结合抗原并得到扩增，最终产生高亲和力抗体，这是抗体亲和力成熟的另一种机制 目前作为我们公司标杆产品的RADIM达到43排第二，也是从国际上对我们标杆的一个认可，之前我们公司自己的产品已进入到中试3阶段，由于之前中试3批评审未通过，需要再生产一批，评价后重新评审 * 可编辑 可编辑 TORCH-IgG抗体亲和力检测 郑州安图生物工程股份有限公司 提纲 抗体亲和力定义 TORCH抗体亲和力检测的意义 TORCH抗体亲和力检测的现状 安图TORCH抗体亲和力检测试剂盒 抗体亲和力是整个抗体分子与抗原表位之间结合强度，即抗体的结合部位与相应抗原决定簇之间的非共价引力与斥力之和。 抗体亲和力（Avidity）的定义 抗体亲和力成熟理论 初次感染产生的抗体为低亲和力抗体，随着时间的