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平板划线法 微生物的恒温培养 微生物的恒温培养 微生物的恒温培养 平板划线时不能划破培养基的原因 一旦划破,会造成划线不均匀,难以达到分离单菌落的目的; 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落,菌落会沿着划破处生长,会形成一个条状的菌落。 点此播放教学视频 2.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线? 3.在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线? 以免接种环温度太高,杀死菌种。 划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落 点此播放教学视频 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么? 操作的第一步灼烧接种环: 每次划线前灼烧接种环: 划线结束后灼烧接种环: 避免接种环上可能存在的微生物污染培养物; 杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。 及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。 稀释涂布平板法 点此播放教学视频 点此播放教学视频 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想,第2步应如何进行无菌操作? 应从操作的各个细节保证“无菌”。例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。 点此播放教学视频 菌种的保存 1、临时保藏法: 对象: 温度: 缺点: 2、甘油管藏法: 对象: 温度: 课题延伸 频繁使用的菌种 4℃(冰箱) 容易被污染或产生异 长期保存的菌种 -20℃(冷冻箱) 点此播放教学视频 四、课题成果评价 (一)培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~2 d后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。 (二)接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。 (三)是否进行了及时细致的观察与记录 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同 点此播放教学视频 【典例解析】 例1.关微生物营养物质的叙述中,正确的 A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量 解析:对于A、B选项,它的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源,如二氧化碳;有的碳源可同时是氮源,如NH4HCO3;有的碳源同时是能源,如葡萄糖;有的碳源同时是氮源,也是能源,如蛋白胨。对于C选项,除水以外的无机物种类繁多,功能也多样。如二氧化碳,可作为自养型微生物的碳源;NaHCO3,可作为自养型微生物的碳源和无机盐;而NaCl则只能提供无机盐。对于D选项,无机氮源提供能量的情况还是存在的,如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。 答案:D 点此播放教学视频 苍南县求知中学 洪辉真 整理 课题1 微生物的实验室培养 2. 种类: 按物理形态分 液体培养基 液体培养基常用于发酵工业。 半固体培养基 观察微生物的运动,动力检测,保种 固体培养基 应用微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面 按照培养基用途分 基础培养基 选择培养基 鉴别培养基 按照培养基的成分来分 合成培养基、天然培养基、半合成培养基 液体培养基: 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 点此播放教学视频 天然培养基有血清、血浆、和组织提取液(如鸡胚和牛胚浸液)。 优点:营养成分丰富,培养效果好 缺点:来源受限;成分复杂,影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染; 根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的。 合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。 优点:标准化生产,组分和含量相对固定;成本低 缺点: 缺少某些成分,不能完全满足体外细胞生长需要。 合成培养基: 天然培养基: 点此播放教学视
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