急性毒性及其评价方法.ppt

THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 4. 经注射染毒 (四) 试验程序 1、查阅文献 首先了解分析受试化学物的化学结构和其理化性质，依此查阅文献， 找出与受试化学物化学结构与理化性质近似的化学物的毒性资料，并以文献资料中相同的动物种系和相同接触途径所测得的LD50(LC50)值作为受试化学物的预期毒性中值。 2、预试验 ? 以此预期毒性中值为待测化学物的中间剂量组，再上下各推1～2个剂量组做预试验（每个剂量组间的组距可以大些，有利于找出受试化学物的致死剂量范围） ? 根据确定的剂量组进行染毒 ? 根据预试验的死亡资料确定组距 可根据以下公式计算出剂量分组： i=(lgLD90-lgLD10)／(n-1) 或：i=(lgLD100-lgLD0)／(n-1) 式中i为组距(相邻的两个剂量组对数剂量之差)； n为设计的剂量组数。 3、正式试验 一般来说，根据试验设计所选用的LD50计算方法来确定组数。例如改良寇氏法一般设5～7个剂量组；霍恩法固定设4个剂量组。求得i后，以最低剂量组(LD0或LD10)的对数剂量加上一个i值，即是第二个剂量组的对数剂量，依此类推直至最高剂量组，查各自的反对数即得出各组剂量的真实值。 1 2 3 4 5 6 LgLD0 LgLD0+i LgLD0+2i LgLD0+3i LgLD0+4i ??? 4. 症状观察 (1) 观察时间和周期 测定外源化学物的LD 50 (LC 50 )，一般要 求计算实验动物接触化学物之后两周 （14天）内的总死亡数 对于一些速死性化学物求其LD 50 (LC 50 ) 也可仅计算24小时的死亡率（有些速杀性化学物的24小时LD 50 与两周 LD 50 值往往没有差别 ） 应注明是多少时间的LD 50 值，以便于在进行毒性比较时有共同的基础 （2） 中毒体症和发生过程观察 很多化学物在实验动物接触的初期往往先出现兴奋现象，有的化学物在动物接触的初期首先表现为抑制现象 （3）死亡情况和时间分布：计算LD 50 重点观察和记录每只动物死亡的时间，特别是最早出现死亡的时间以及各个剂量组动物的死亡数。分析中毒死亡时间的规律具有一定意义，可为深人研究化学物的毒作用机制提供参考。 （4）体重： 体重可以反映动物中毒后的整体变化。体重改变的原因很多，若化学毒物刺激或损伤消化道可出现试验动物饮食减少甚至拒食，表现为体重减轻；若化学毒物引起腹泻，将影响食物吸收和利用，体重也会减轻。如果化学毒物影响水的摄取或肾功能急性损伤，也可能在体重上反映出来。所以，对存活动物尤其是对低于LD50剂量组的存活动物，应在观察期14天内称量其体重的变化，以便了解受试物引起毒效应的持续时间。 （5）病理检查和其它指标观察 凡中毒死亡动物应及时解剖做病理学检查，检查器官有无充血、出血、水肿或其它改变，并对有变化的脏器作病理组织学检查 对存活动物于观察期结束后应做病理学检查 根据试验需要可进行某些生化指标测定等 经典急性毒性试验的局限性 消耗的动物量大 获得的信息有限 测得的LD50是一个统计近似值 在安全性评价中仅评价动物死亡和简单的症状观察是不够的，更需要的是生理学、血液学及其它化验检查所提供的深入细致的毒性信息。 急性毒性替代试验 固定剂量法 上－下移动法 四、急性毒性分级和评价 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 可编辑 可编辑 急性毒性及其评价方法 Acute Toxicity Testing 一、急性毒性的概念 急性毒性：是指机体(人或实验动物)一次或24小时内多次接触外源化学物后在短期内所产生的毒性效应。 包括外观改变、大体形态变化、行为方式及死亡效应，最主要观察指标是LD50 ?实验动物接触化学物的方式或途径不同， “一次”的含义也有所不同 经口和注射接触，“一次”是指在瞬间将受试化学物输入实验动物体内 经呼吸道吸入与经皮肤接触，“一次” 是指在一个特定的期间内实验动物持续地接触受试化学物的过程 二 、急性毒性试验的目的 1. 测试和求出受试化学物的致死剂量 (通常以LD 50 为主要参数)，并对该外源化学物进行急性毒性分级 2. 通过观察动物中毒作用表现、毒作用强 度和死亡情况，初步评价毒物对机体的毒效应特征、靶器官、剂量－反应关系和对人体产生损害的危险性 3. 为亚慢性及慢性毒性试验研究以及其他 毒理试验提