QC-OP-003-v1-鸡红细胞悬液配制方法.doc

操作细则 质量检验部 扬州威克生物工程有限公司 参考号: QC/OP/003 版本: 1 生效日: 2008-04-10 PAGE 5/ NUMPAGES 6页 标题: 鸡红细胞悬浮液的配制操作细则 操作细则 质量检验部 扬州威克生物工程有限公司 文件编号：QC/OP/003 版本： 1 生效日：2008-0 PAGE 1/ NUMPAGES 6 页 标题： 鸡红细胞悬浮液的配制操作细则 制作 审核 批准 姓名: 日期: 签名: 姓名: 日期: 签名: 姓名: 日期: 签名: 1. 历史记录?: 版本号 变更描述 发布日期 1 初次发布 2008-0 2. 需要发放的部门: 质量部（QA），质检部（QC） 摘要 目录 TOC \o 1-5 1. 目的 3 2. 原理 3 3. 材料 3 4. 方法 3 4.1. 采血 3 4.2. 保存血液 3 4.3. 用生理盐水洗涤来纯化红细胞 3 4.4. 配制红细胞悬浮液 4 5. 结果 4 6. 相关文件 4 7. 附件 4 目的 配制鸡红细胞悬浮液以供 HA 和HI实验。 原理 采血时加入抗凝剂来防止血液凝集。接着通过离心来分离纯化红细胞。用生理盐水来稀释纯化的红细胞，获得一定浓度的红细胞悬浮液。 材料 SPF 鸡 离心机 5℃±3 洗耳球 100 ml玻璃瓶 阿氏液 生理盐水，pH 7.15 10 ml注射器 15 ml离心管 10 ml吸管 1 ml吸管 标签纸 方法 采血 采血时加入的抗凝剂(阿氏液)与鸡血的体积比约为 3 : 7。下面是以采约7 ml鸡血为例，加入的 阿氏液约为3 ml。 用10 ml 注射器吸取约 3 ml 的阿氏液。 采血：操作员用一只手保定鸡，把注射器的针头插入鸡翅膀处的静脉血管或鸡心脏采约 7 ml的血。 去掉注射器的针头把血液转入15 ml离心管中。 轻轻摇晃离心管把血液与阿氏液混合均匀。 如果采血和配制红细胞在同一天进行，请参照4.3节。 如果配制红细胞在采血几天之后进行，请参照4.2节。 保存血液 把试管中的血液转入一 只100 ml的玻璃瓶中。 用阿氏液4倍稀释血液，例如：我们采了约7 ml的鸡血，此外血液中还有约3 ml的阿氏液，因此一共约有10 ml血液。这种情况下需再向玻璃瓶中加30 ml的阿氏液来 4倍稀释血液。 把血液保存于 5℃±3℃ 冰箱中.，血液在 5℃±3 用生理盐水洗涤来纯化红细胞 把血液转移到一支15 ml 的离心管中。 用生理盐水洗涤血液以纯化红细胞。 1500 RPM离心血液10分钟。 用10 ml吸管弃去上清液和白细胞，在血液细胞沉淀的上部的白色层为白细胞。 向离心管中加生理盐水至14 ml左右。 用10 ml吸管轻轻的重新悬浮RBC。 血液至少需要用生理盐水洗涤三次，当离心后上清液与未使用过的生理盐水一样透明时，可以停止洗涤了。 配制红细胞悬浮液 完成最后一次洗涤后弃去上清液和白细胞。 在一只100 ml玻璃瓶上标明： 红细胞悬浮液的浓度，如 1%RBC 或 2%RBC 配制日期 根据所需配制的红细胞悬浮液的体积来计算配制RBC悬液所需要的生理盐水和纯化红细胞的量。 用10 ml吸管向玻璃瓶中转移所需量的生理盐水。 用1 ml吸管向玻璃瓶中转移所需量的纯化红细胞。 用玻璃瓶中的生理盐水把黏附于1 ml 吸管内壁上的红细胞全部洗出。 把红细胞保存于5±3℃冰箱，红细胞悬浮液在5±3 结果 无 相关文件 无 附件 无 文件培训名单 接收部门需培训人员名单 培训（阅读）日期 被培训人（签名） 注1：此联由各接收部门的经理保管、备案。 2：下页由质量保证部门留存 操作细则 质量检验部 扬州威克生物工程有限公司 文件编号：QC/OP/003 版本：1 生效日：2008-0 PAGE 6/ NUMPAGES 6页 标题： 鸡红细胞悬浮液的配制操作细则 文件发放清单 发放部门 发放日期 接收部门 接受份数 接收人签名 接收日期 回收日期 回收份数 销毁日期 销毁人签名