血液标本采集和全血细胞计数.ppt

仪器不同模式可比性评价 评价材料：临床样本，覆盖常见的测量范围 评价方法：至少取5份样本（高，中，低）在参考仪器和比对仪器上做双次测试，分别计算其均值，比对：（参均-比均）/参均×100% 评价标准：?北京市二级以上医院医学检验科校准和实施指南? WBC RBC HGB HCT PLT 7.5% 3% 3% 3% 12.5% 异型淋巴细胞 Ⅰ型（泡沫型） Ⅱ型（不规则型） Ⅲ型（幼稚型） 实验三 红细胞形态的观察 【目的】掌握正常红细胞和各种形态异常红细胞特点。 【原理】血液涂片经瑞士吉姆萨染色后在显微镜下观察，判断红细胞是否出现大小，形态、结构异常。 红细胞形态 红细胞大小不均(anisocytosis) 红细胞结构异常 Howell-Jolly body,Cabot ring 球形红细胞 椭圆形红细胞 口形红细胞 棘形红细胞 靶形红细胞 泪滴形红细胞 镰形红细胞 红细胞缗钱状形成 4.网织红细胞计数Reticulocyte count 目的：了解网织红细胞的活体染色过程、形态学特点、计数方法，掌握其参考值和临床意义。 原理：网织红细胞是晚幼红细胞脱核后到完全成熟的红细胞之间的过渡型细胞。由于其胞质中尚残存核糖体等嗜碱性物质，故经煌焦油蓝染液活体染色后，可见有蓝绿色的点状、线状或网织样结构，故名网织红细胞。其点线状结构愈多，表示细胞越年轻，反之则更近于成熟红细胞。 Procedure 小试管中 加1%煌焦油蓝生理盐水溶液2滴。 在加全血2滴，立即混匀，室温下染色15min。 倾出l小滴以15度角制备薄涂片。 干后，低倍镜下选细胞分布均匀，着色清晰处，油浸镜下进行观察。 为便于计数，可于接目镜筒中放一缩小视野用的具有直径为3mm圆孔的纸片。 计数1000个红细胞，记录其中的网织红细胞数。即可得出网织红细胞的百分数值。 如1000个红细胞中见到6个网织红细胞，则百分率为0.6% 1％煌焦油蓝生理盐水溶液： 煌焦油蓝 1.0g 枸橼酸钠 0.4g 氯化钠 0.85g 蒸馏水加到100mI Refernence range Adult 0.5~1.5% Newborns 2-6% Reticulocyte 丝球型 鱼网型 破网型 点粒型 Clinical significance 各种增生性贫血时Ret增高，造血功能障碍时Ret 减低。 观察贫血治疗的疗效。 可作为肿瘤化疗、骨髓移植后骨髓造血功能受抑或恢复的观察指标。 3.红细胞沉降率Erythrocyte sedimentation rate ESR 目的：了解血沉的操作技术及读取方法，掌握其参考值及临床意义。 原理：血液经枸橼酸钠抗凝后，吸于特制的血沉管中，垂直竖立1小时，观察其红细胞下沉的速度，以所暴露出的血浆段的高度（mm）表示。 动态测定法：在计算机控制下通过光电技术定时扫描红细胞与血浆的界面位置。 Male: 0～15mm/h; Female0～20mm/h 实习三:血液分析仪使用及性能评价 血液分析仪Hematology Analyer 两大功能 细胞计数功能 细胞分类功能 原理 电阻抗法 光散射法 Sysmex KX-21 ：三分群 Beckman Coulter STKS ：五分类 电阻抗原理Principle of electrical impedance Coulter principle 根据血细胞相对非导电的性质，悬浮在电解质溶液中的血细胞颗粒，在通过计数小孔时可引起电阻的变化为基础，对血细胞进行计数和体积测定。 电阻抗原理计数Principle of electrical impedance 将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液置入不导电的容器中，将小孔管（transducer）插进细胞悬液中。 小孔管内充满电解质溶液，并有一个内电极，小孔管的外侧细胞悬液中有一个外电极。 接通电源后，位于小孔两侧的电极产生稳定的电流。 当细胞通过小孔时，瞬间引起了电压变化而出现一个脉冲信号。 脉冲大小反映细胞体积大小，脉冲数量代表细胞数量。 Sysmex KX-21 电阻抗原理分类（三分群） 不同体积的白细胞通过小孔时产生的脉冲大小有明显差异，根据这些脉冲大小，可对白细胞进行分群。 小细胞区：主要是淋巴细胞 单个核细胞区(也 称作中间细胞) :主要包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞 大细胞区：主要是中性粒细胞 容量、电导、光散射检测原理（VCS） Volume conductivity light scantter Volume：应用电阻抗原理测量细胞体积 Conducti