血小板抗原抗体检测.PPT

血小板抗原抗体 目录 血小板相关疾病 血小板抗原 血小板抗体 抗体检测及交叉配血 血小板抗原 血小板抗原泛指存在于血小板膜的能够刺激机体产生抗体,并能与之结合的血小板膜蛋白质和糖分子. 血小板相关抗原: 红细胞血型抗原：ABO、Lewis和P系统抗原等，无RH抗原 白细胞抗原：HLA抗原 血小板特异性抗原（human platelet antigen，HPA） 血小板抗原 血型抗原：ABO、Lewis和P系统抗原等，无RH抗原 来源：血小板表面的A、B抗原来源主要有两个：大部分是血小板本身所固有（从巨核细胞分化而来）；小部分是从血浆吸附而来。如体外将O型血小板和A或B型血清温育，血小板就会带上A或B抗原。 不同个体间血小板膜ABH抗原量存在差异; 同一个体的每一个血小板抗原量差别非常大，由此可以解释有些人输入ABH不相容血液后,一部分输入的血小板迅速被破坏,而另外的血小板其生命力不受影响. 血小板抗原 白细胞抗原：HLA抗原 血小板存具有HLA-Ⅰ类抗原类抗原，主要是HLA-A和HLA-B位点的抗原（少量表达的HLA-C抗原）。 HLA-Ⅰ类分子为血小板的固有蛋白，少量从血浆中吸附。血小板HLA抗原的免疫原性比白细胞弱。 血小板抗原 血小板特异性抗原（human platelet antigen，HPA） 主要位于人血小板膜的一大类抗原,称之为血小板特异性抗原 高频率抗原以“a”表示，低频率抗原以“b”表示 人血小板同种抗原（HPA）自1959年被发现以来，迄今已经检出24个抗原，其中HPA-1，-2，-3，-4，-5，-6,-15被血小板命名委员会（PNC）列入抗原系统，包含14个对偶抗原，而HPA-7-14，-16,-17因为对偶抗原未检出而未达到系统命名标准。 血小板抗原 血小板抗原 血小板抗原 24个抗原主要分布在糖蛋白GPⅡb，GPⅢa，GPⅠb，GPⅠa以及CD109上 ； GPⅢa（CD61）携带9种HPA抗原，分别为HPA-1，HPA-4，HPA-6bw，HPA-7bw，HPA-8bw，HPA-10bw，HPA-11bw，HPA-14bw，HPA-16bw GPⅡb（CD41）是跨膜蛋白，细胞外116 kD的重链，通过二硫键与22 kD的轻链共价结合。GPⅡb上携带 HPA-3和HPA-9bw； 血小板抗体 抗 体 分 类 疾 病 HLA / HPA 抗 体 其 它 抗 体 同 种 抗 体 格兰茨曼血小板功能不全病 抗GPⅡb/Ⅲa抗体 同 种 异 体 抗 体 新生儿同种异体免疫性血小板减少症 HPA1b(78%), HPA5b(19%) HPA-2,3,4(3%),HPA-15,HPA-9bw, Anti-CD36 血小板输注无效症 HLA-I抗体50~80% 17~25%(日本人为HPA-2b), HPA-15, anti-CD36 极少数为ABO抗体 血小板输血后紫癜 HPA-1a,HPA-1b,HPA-2b,HPA-3a,HPA-3b,HPA-15, anti-CD36 少数为抗GPIa/IIa抗体 被动同种异体免疫 性血小板减少症 HPA-1a,HPA-5b 移植相关同种异体 免疫性血小板减少症 HPA-1a,HPA-3,HPA-5b 自 身 抗 体 自发性血小板减少 症 多数位于GPⅡb/Ⅲa GPIb/IX/V，少数位于 GPIV/V 和 GPIa/IIa 继发于母体自发性 血小板减少症 同上 药物依 赖性抗 体 奎宁/奎尼丁抗体 所致疾病 抗原位于GPⅡb/Ⅲa和GPIb/IX 肝素抗体所致疾病 抗原表位是PF4 抗体检测及交叉配血 采取预防和治疗措施 避免流产、出血等 血小板相容性检测 抗原定型 抗体检测 建立血小板供者库 筛选基因型相容的供者 避免血小板抗体的产生 诊断血小板免疫性疾病 交叉配型 筛查血小板相容性供者 减少血小板输注无效 避免紫癜、出血和死亡 血小板抗原定型 血清学定型 即用已知特异性抗体检测血小板血型抗原 缺点：特异性抗体来源困难 ---人血清中血小板抗体通常为多特异性 ---单克隆抗体匮乏，目前国际上仅有HPA-1a单抗， 无其它HPA单抗。 基因定型 限制性片段长度多态性分析（RFLP） 序列特异性寡核苷酸聚合酶链反应(PCR-SSO) 序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP) HPA-1 HPA-2 HPA-3 HPA-4 HPA-5 HPA-15 a b a b a b a