稻草秸秆中木质素纤维素测定方法.ppt

可编辑 可编辑 稻草秸秆中木质素、纤维素测定方法的研讨 稻草秸秆中木质素、纤维素测定方法的研讨 姓名：蔚慧青 学号：201010836221 测定木质素、纤维素含量的方法很多,如纤维素含量的测定方法有浓酸水解定糖法、硝酸乙醇法、氯化法等;木质素含量的测定方法有浓酸水解法、紫外分光光度法、红外光谱定量分析法和同位素标记法。由于红外光谱法和同位素标记法对实验室要求较高,所以应用并不普遍。我们常用的是浓酸水解法。本试验应用中性洗涤剂法、2M HCl水解法、72%H2SO4水解法及灰化法综合运用,一次性进行木质素、纤维素的测定,并将灰化时间缩短至3h,所得结果较为准确。 1.1 材料 稻草经机器粉碎成1cm长细秸,粉碎成1cm长稻草粉分别经Z17、921和1024三种白腐真菌菌株发酵,每周取样一次,共7周。 1.2 主要试剂 中性洗涤剂:按Van Soest方法配制； 2M 盐酸溶液:167ml浓盐酸(比重1.19)用蒸馏水定溶至1000ml； 72% 浓酸溶液: 665mlH2SO4(比重1. 84)加入300ml水中,冷至20℃,补加水至1000ml。 基过程本 1. 材料与方法 1.1 材料 1.2 主要试剂 1.3 方法 2. 结果与讨论 2.1结果分析 2.2总结 1.3 方法 取经80℃3h烘至衡重的三个菌株各5g。 1.3.1 取1.0000g样品置于100ml碘瓶中,加入70ml中性洗涤剂,之后放入已沸的高压锅,100℃保温40min,115~121℃保温20min,取出用3号30ml沙芯坩埚过滤至pH 6.5~7.0,依次用95%乙醇、无水乙醇和丙酮洗涤2次,将残渣置真空干燥器中,干燥20min。 1.3.2 将残渣连同坩埚置于100ml烧杯中,加入70ml 2M盐酸溶液,然后放入已沸的高压锅,100℃保温50min,过滤至中性,依次用95%乙醇、无水乙醇和丙酮洗涤2次,残渣80℃烘至衡重为W1。 1.3.3 将残渣连同坩埚置于150ml烧杯中,加入10ml 致冷的72%硫酸,20e降解4h,后加入90ml蒸馏水,室 温过夜,次日用蒸馏水洗残渣至pH 6.5,烘干至衡重为 W2,W1-W2为纤维素的含量。 1.3.4 将残渣在550e马福炉中灰化,干燥器中平衡 至衡重为W3,W2-W3即为木质素的含量 2 结果与讨论 本测定方法是在原有方法基础上加以改进,按照王玉万(1987)半纤维素、纤维素、木质素系统定量分析程序方法,纤维素测定前两步同上面方法(1.3.1、1.3.2,1.3.3),于620nm测OD由葡萄糖标准曲线求出糖量,乘上系数0.9,求得纤维素,将残渣80℃烘干,干燥器冷却30min,称重;在550e马福炉中灰化4小时,干燥器冷却30min,称重,前者称重数减去后者称重数即为木质素含量。而经我们改进后的方法就直接按上面方法(1.3.3,1.3.4),所测结果见表1。 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 结果分析 三个菌株的木质素由接种前含16.63%经49d培养分别减少至9.89%、10.30%、10.87%,纤维素含量由接种前含30. 35%经49d培养后分别减少至23.12%、22.72%、25.03%,说明木质素、纤维素含量都明显减少,同我们以往所做的分析结果基本相似。 优点: (1) 节约试剂:按照王玉万(1987)方法,纤维素含量的测定需要蒽酮试剂,并且蒽酮试剂需要现配现用,相对来说我们的方法比较简便,同时减轻了工作量; (2) 减少人员,节约电源:王玉万的方法灰化需要4h,现在只要3h就可灰化好。而且所测结果同以往我们所做的分析结果基本相似。 结论： 说明在不考虑酸溶木质素含量和不需了解培养物中木质素、纤维素的绝对含量时,本测定方法是可行的。 2013.04.22 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 可编辑 可编辑