精子活率、密度、畸形率.PPT

* * 精子活率、密度、畸形率和精液PH值的测定 实验目的 通过实验，了解精子的运动方式；识别正常精子和异常精子的形态。初步学会和掌握精液密度、精子的活率、畸形率和精液酸碱度（PH）的测定方法。熟悉肉眼检查精液品质的方法。 实验材料 家畜精液、载玻片、凹灶玻片、盖玻片、球棒、医用中性石腊油、75%酒精棉球、酒精灯、伊红染液、纱布、棉花、火柴、PH比色器、PH试纸、烧杯、显微镜、保温箱。 方法步骤 一、精液的肉眼检查（一）射精量(ml) 概念: 射精量是指每次射精的体积 测定: 以连续3次以上正常采集到的精液的平均值代表 测定方法:将采得的精液倒入有刻度的试管或杯中，测其容量。 各种家畜的平均射精量为： 奶牛：5-10；肉牛：4-8； 绵羊：0.8-1.2 ；猪：150-500；山羊：0.5-1.5；马：30-100 射精量不正常的原因 现 象 原 因 过 少 采精过频、性机能衰退、睾丸炎、发育不良 过 多 副性腺发炎、假阴道漏水、尿潴留、采精操作不熟练 （二）观察精液的颜色并嗅闻气味 观察精液的色泽并嗅闻气味。 一般为乳白色或灰白色。正常牛羊精液呈乳白色或乳黄色，猪、马的精液呈淡乳白色或浅灰白色。 正常精液具有一种特有的腥臭味，该气味由前列腺产生。是由一种称为精氨的化学物质经过氧化以后散发出来的，很像栗子花的味道。精氨是前列腺分泌物所含的多种成分之一。 腥味：有脓液 臊味：有尿液或包皮液 不正常精液颜色原因分析 正常精液特征 依从浓到稀：乳黄-乳白-白色-灰白 淡红（鲜红） 生殖道下段出血或龟头出血 淡红（暗红） 副性腺或生殖道出血 绿 副性腺或尿生殖道化脓 褐 混有尿液 (三)云雾状 是指新鲜精液在33-35℃ 温度下，精子成群运动所产生的上下翻卷的现象。 云雾状的明显程度代表高浓度的精液中精子活力的高低。 云雾状分级标准 +++ 翻明显而且较快 ++ 翻明显但较慢 + 仔细看才能看到精液的移动 - 无精液移动 二、精子活率测定 精子活率：在显微镜下观察，在一个视野内向直线前进运动的精子占全部精子总数的百分率。 一般在37-38°C温度下进行评定，牛、羊精液尚需用生理盐水作稀释后才能评定。  活力一般用0-1.0的10级评分，一般新鲜采精液活率应该为0.7~0.8左右。 测定精子活率的方法很多，有活精子计算法，死活精子染色法和目测法。目测法因使用的材料和工具不同，又可分为平板压片法、悬滴检查法和油盖检查法三种。 1、平板压片法 （1）取高温消过毒的载玻片、盖玻片、玻棒若干备用。 （2）滴一滴精液（如太浓，可先用生理盐水稀释）于消毒过的载玻片上，盖上消毒过的干净盖玻片。 （3）将制好的片子放在显微镜载物台上，先用低倍镜观察，后用高倍镜（400～600倍）观察（如气温低，须将显微镜置于保温箱内升温到37℃后，再进行镜检）。 2、悬滴检查法 （1）滴一小滴精液于消毒好的盖玻片中央。 （2）在凹灶处周围涂上少量水，然后将凹处对准盖玻片上的精液，并覆盖于盖玻片上，使其贴在一起。 （3）将玻片倒转过来，使精液滴悬挂于盖玻片下，便可放在显微镜下观察。 3、油盖检查法 （1）滴一滴精液于消毒过的载玻片上。 （2）在精液上面滴一滴医用中性石腊油即可放在显微镜下观察。 4、活率的评定 （1）在显微镜下观察精子的运动方式，并区别直线前进式运动、旋转式运动和摆动式运动的精子活动的情况。 （2）根据视野中呈直线前进式运动的精子所占比例进行测定。如全部精子均呈直线前进式运动，看不到非直线前进式运动的精子，可评为“1.0”分；如果视野中只有80％的精子呈直线前进式运动，其余20% 呈非直线前进式运动，则评为“0.8”分，其余依此类推。测定时要求多看几个视野，然后进行综合评定。在一个视野中，如果呈前进式运动的精子占多数，则重点估测非前进式运动的精子所占比例，反之则估测前进式运动的精子所占比例。 三、精子密度检查 测定精液密度的方法有估测法，红细胞计数法和光电比色法。其中估测法通常结合精子活率进行检查，一般用测定活率的平板压片法进行。 取一小滴精液于清洁的载玻片上，加上盖玻片，使精液分散成均匀一薄层，但不得有气泡，也不能使精液外流或溢于盖玻片上，置显微镜下放大400～600倍观察，按下列等级评定其密度（如图2-1）。 图2-1 稀 中