第七章体外抗原抗体反应概述.PPT

Ab/Ag过剩 过剩方的结合价得不到饱和，大多数游离存在，只形成小分子复合物（不可见）。 最适比(optimal ratio)：是指形成沉淀物最多，上清液清晰，几乎无游离抗原或抗体的抗原抗体浓度比。 等价带(equivalencezone)：形成沉淀物最多的抗原与抗体分子比例合适的范围。 带现象：在等价带前后，由于抗体和抗原过量，形成的沉淀物少，上清液中可测出游离的抗体或抗原的现象。 前带(prozone)抗体过量时称为。 后代(postzone）抗原过量时称为。 5、一组概念 带现象包括 在抗原抗体反应中，抗体（或抗原）与一定量的对应物结合出现可见反应所需的最小量称为效价（或滴度），一般以最高稀释倍数表示，正好是稀释度的倒数。 三、可逆性（reversibility) 1、概念：是指抗原与相应抗体结合成复合物后，在 一定条件下可解离为游离抗原与抗体的特 性称为抗原抗体结合的可逆性。 2、原因：抗原抗体的结合是分子表面的非共价键结合，因此形成的复合物不牢固。 3、抗原抗体反应动态平衡式如下： 4、决定抗原抗体解离的因素 （1）抗体与相应抗原的亲合力。 亲合力低的抗体与抗原形成的复合物较易解离。 （2）环境因素对复合物的影响。 PH过高或过低、增加离子强度均可破坏 静电引力，使抗原抗体结合力下降，促使其 解离。 注意：解离后的抗原或抗体仍然保持其原有生物活性 * 在免疫化学中，一般用：亲和力（affinity）及亲合力（avidity）表示。 * 是医学检验的重要学科之一 * 三.影响因素：P74　　　1.电解质：缓冲液：反应条件最好，价格便宜，配制方便　　　2.PHeg:why 37℃1h而不用0.5h　why PH7.4　　不是7.6　　　3.温度：45℃　37℃　4℃　　　　温度选择反应完全，即AgAb多反应时间短　　　　条件较易创造　　　　温度高,反应时间短，形成复合物结构松　　　　温度低,反应时间长，形成复合物结构紧　　　4.反应时间 * 温度升高，分子运动快，碰撞接触机会多，结合速度快。 第七章 体外抗原抗原反应概述 抗原抗体反应：是指抗原与相应抗体的特异性结合反应 体内 杀菌、溶菌、调理、中和毒素 免疫病理损伤—超敏反应、免疫性疾病等 体外：凝集、沉淀、溶细胞、中和毒素、补体结合等 第一节 抗原抗体反应的原理 抗原抗体结合反应是抗原决定簇和抗体分子超变区之间的相互作用，是一种分子表面的特异的可逆的弱结合力（只能在极短距离内才能发生效应）。 抗原抗体结合反应的条件： ①抗原与抗体间的特定部位的空间结构必须相互吻合，具有互补性（先决条件）; ②抗原决定簇与抗体超变区必须紧密接触，才能有足够的结合力，使抗原抗体分子结合在一起。 不形成牢固的共价键，通过非共价键结合 这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力 一、抗原抗体的结合力 1、静电引力 2、范德华引力 3、氢键 4、疏水作用力 1、静电引力 概念：抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互的引力。又称库伦引力。 静电引力的大小与两个相互作用基团间的距离的平方成反比。 二、范德华引力 概念：抗原和抗体相互接近时，各自所携带的原子与原子、分子与分子由于分子极化作用而出现的引力。 结合力的大小与两个相互作用基团的极化程度的乘积成正比、与它们之间距离的7次方成反比。 作用力最小 作用大小取决于二者分子空间构型的互补性 概念：供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力。 三、氢键结合力 供氢体：－COOH、－NH2和－OH 受氢体：氧、氮 氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离的6次方成反比。 最具特异性（必须供氢体和受氢体互补才能实现氢键的结合） 四、疏水作用力（疏水键） 概念：两个疏水基团在水溶液中相互接触时，由于对水分子排斥而趋向聚集的力。 抗原决定簇与抗体上的结合点靠近，互相间 正、负极性消失，亲水层立即失去。 结合力最强，约占总结合力的50％。 静电引力：异性相吸 （electrostatic forces） 范德华引力:作用最小 （van der Waals interactions） 氢键:最具特异性 （hydrogen bond ） 疏水作用力:作用最大 （hydrophobic interactions） 抗原抗体结合力示意图 抗原抗体结合力 结合力的大小 亲和力（affinity） 表示 亲合力（avidity） 二、抗原抗体的亲和力和亲合力