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柠檬酸分子式为C6H8O7,外观为白色颗粒状或白色结晶粉末,无臭,具有令人愉快的强烈的酸味,相对密度为1.6550。 柠檬酸易溶于水、酒精,不溶于醚、酯、氯仿等有机溶剂。商品柠檬酸主要是无水柠檬酸和一水柠檬酸。它天然存在于果实中,其中以柑橘、菠萝、柠檬、无花果等含量较高。 柠檬酸是生物体主要代谢产物之一。早期的柠檬酸生产是以柠檬、柑橘等天然果实为原料加工而成的。 柠檬酸 (五)柠檬酸的生产 1、柠檬酸在食品中的应用 (1)饮料与冰激凌 柠檬酸广泛用于配制各种水果型的饮料以及软饮料。 (2)果酱与酿造酒 柠檬酸在果酱与果冻中同样可以增进风味,并使产品抗氧化作用。 (3)腌制品 各种肉类和蔬菜在腌制加工时,加入或涂上柠檬酸可以改善风味,除腥去臭,抗氧化。 (4)罐头制品 加入柠檬酸除了调酸作用之外,还有螯合金属离子的作用,保护其中的抗坏血酸,使之不被金属离子破坏。 (5)豆制品及调味品 用含有柠檬酸的水浸渍大豆,可以脱腥并便于后续加工。 (6)其他 柠檬酸在医药、化学等其他工业中也有一定的作用。 2、柠檬酸发酵菌种 (1)黑曲霉的形态特征 在固体培养基上,菌落由白色逐渐变至棕色。孢子区域为黑色,菌落呈绒毛状,边缘不整齐。菌丝有隔膜和分支。是多细胞的菌丝体,无色或有色,有足细胞,顶囊生成1层或2层小梗,小梗顶端产生一串串分生孢子。 (2)柠檬酸发酵机制 关于柠檬酸发酵的机制虽有多种理论,但目前大多数学者认为它与三羧酸循环有密切的关系。糖经糖酵解途径(EMP途径),形成丙酮酸,丙酮酸羧化形成C4化合物,丙酮酸脱羧形成C2化合物,两者缩合形成柠檬酸。 (3)柠檬酸发酵用原料 柠檬酸发酵的原料有糖质原料、淀粉质原料和正烷烃类原料3大类。 L-苹果酸广泛存在于生物中,是生物体三羧酸循环的成员。苹果酸广泛应用于食品领域。因为苹果酸具有比柠檬酸柔和的酸味,滞留时间长和口味更好的优点,所以作为食品酸味剂更为理想。 许多微生物都能产生苹果酸。工业生产目前仅限于少数几种:用于一步发酵法的黄曲霉、米曲霉、寄生曲霉;用于两步发酵法的华根霉、无根根霉、短乳杆菌、膜睽毕赤酵母;用于酶转化法的短乳杆菌、大肠杆菌、产氨短杆菌、黄色短杆菌。 (六)苹果酸 以糖类为发酵原料,用霉菌直接发酵生产L-苹果酸的方法称为一步发酵法。一步发酵法采用黄曲霉A-114生产苹果酸。 两步发酵法是以糖类为原料,先由根霉菌发酵生成延胡索酸和苹果酸的混合物,然后接入酵母或细菌,将混合物中的延胡索酸转化为苹果酸。 根霉 黄曲霉 1)一步法发酵 种子培养基组成(%) 葡萄糖 3%,豆饼粉 1%, FeSO4 0.05%,K2HPO4 0.02%,NaCl 0.001%,MgSO4 0.01%,CaCO3 6% (单独灭菌)。 种子培养 将黄曲霉孢子用无菌水洗下并移接到装有100ml种子培养基的500m1三角瓶中,在33℃下静置培养2~4d,待长出大量孢子后,将其转入到种子罐扩大培养,接种量为5%。培养温度33~34℃,通风量0.15~ 0.3m3/m3.min,培养时间18~20h。 发酵培养基 葡萄糖 7%~8%,其余成分的组成及用量与种子罐培养基相同。 从发酵醪液中提取苹果酸 工艺流程 发酵液→酸解→过滤→滤液→中和→过滤→沉淀→酸解→过滤→滤液→精制→浓缩→结品→干燥→成品 2)两步法发酵 1) 富马酸发酵 ① 菌种 两步发酵法以华根霉6508为菌种生产苹果酸。 ② 斜面培养 华根霉6508于葡萄糖马铃薯汁琼脂斜面上,30℃培养7d,易于长出大量孢子。 ③ 摇瓶发酵 a 培养基组成(%) C6H12O6 10,(NH4)2SO4 0.5,K2HPO4 0.1,聚乙二醇10,MgSO4 0.05,FeCl3 0.002,CaCO3 5(单独灭菌)。 b 富马酸发酵 在500ml三角瓶中装入50ml培养基,灭菌,冷却。接种华根霉孢子,置往复式摇床上,于30℃下培养4~5d,发酵得到含富马酸和苹果酸的混合液 c 提取 从混杂富马酸发酵醪液中提取苹果酸 发酵醪液→浓缩→析出富马酸结晶→过滤→滤液→浓缩→析出富马酸结晶→过滤→滤液→冷却,加晶种→苹果酸结晶→干燥→成品 霉菌及其在发酵产品中的应用 主要内容 (一) 霉菌制曲 (二)生产酱类产品 (三)腐乳 (四)豆豉 (五)柠檬酸 (六)苹果酸 霉菌在食品工业中用途十分广泛,许多酿造发酵食品、食品原料的制造,都是在霉菌的参与下生产出来的。 绝大多数霉
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