第4章 免疫球蛋白.ppt

●血清IgD的生物学功能不清楚 ●膜型IgD(mIgD)构成BCR，是B细胞分化成熟的标志 单克隆抗体(monoclonal antibody, McAb)：由识别一种抗原决定基的细胞克隆所产生的均一性抗体 DNA合成途径：①从头合成和：以谷氨酰胺和尿苷为原料，可被氨基喋呤(A)阻断； ②补救合成：在次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶(HGPRT)作用下利用次黄嘌呤(H)和胸苷(T)为原料。 细胞融合后，加入HAT选择培养基，未融合骨髓瘤细胞因其①被A阻断而又缺乏HGPRT不能循②合成DNA，故死亡；未融合脾细胞自然死亡；仅融合细胞从脾细胞获得HGPRT，故可在HAT选择培养基中存活并增殖。 抗体应用中存在的问题及其解决思路 ●异种蛋白反应 ●穿透力差 ●外源性Ig的体内半衰期较短 ●特异性差或过于单一 ●生产过程较长 ●价格昂贵 ●应用范围有限 * IgM ●先锋免疫 产生最早： * 脐带血IgM增高提示胎儿有宫内感染 * 感染过程中血清IgM水平升高说明有近期感染 分子量最大 抗原结合力最强 激活补体经典途径能力最强 作为BCR * 特性 ●血清型 IgA ●分泌型IgA(secrete IgA, sIgA) sIgA通过初乳被动转移给新生儿 * IgA * IgD * 血清含量最低 与肥大细胞和嗜碱性粒细胞Fc?R结合 * IgE * * 第4节 人工制备抗体 一、多克隆抗体 二、单克隆抗体 特点： ●高度均一，抗原特异性及同种型一致 ●易于体外大量制备和纯化，纯度高 ●特异性强，少或无交叉反应 ●效价高 * * * * * 存在的问题 * ●单抗技术的改进：兔单抗、缩短时间、提高亲和力、降低成本等 ●人源化单抗的研制：人-鼠杂交瘤、人-人杂交瘤 ●基因工程抗体的研制：抗体人源化、降低分子量、新效能抗体等 ●细胞内抗体的研制 ●抗体库的建立 ●抗体药物的研制 ●抗体制备的产业化 ●抗体应用范围的拓展 解决问题的思路 * * 三、基因工程抗体—— Ig分子上 的星球大战 * 基因工程修饰鼠源抗体 * * * * * * ●诊断：已知抗体查未知抗原 ●预防：应急预防（破伤风，Rh不合的新生儿溶血等） ●治疗：感染、抗移植排斥、抗炎、抗肿瘤 ●科研：提取、纯化、鉴定、分析 抗体的应用 * ●Ig的结构：Ig分子由2条H链和2条L链通过二硫键连接而成; VH和VL是抗原结合部位，CH区可结合补体、结合不同细胞表面的Fc受体。 ●Ig的功能: 结合抗原、激活补体、调理吞噬和介导ADCC、通过胎盘、结合SPA ●不同类别Ig的特性：在体内发挥不同的免疫效应 ●抗体的制备：多克隆抗体、单克隆抗体与基因工程抗体 ●抗体的应用：诊断、预防、治疗、科学研究 小 结 * ●试述免疫球蛋白的基本结构。 ●简述抗体的生物学活性。 ●简述各类免疫球蛋白的生物学特性及功能。 ●什么是单克隆抗体？其优点是什么？ ●举例说明抗体的实际应用？ ●解释名词：抗体、Ig、Fab段、Fc段、CDR、HVR、Fc受体、Ig domain、免疫球蛋白超家族(IgSF)、VH、VL、ADCC、独特型、IgM 思考题 * 第4章 免疫球蛋白 ●抗体 (antibody，Ab): B细胞识别抗原后增殖分化为浆细胞所产生的能与抗原特异性结合的球蛋白。 ●免疫球蛋白(immunoglobulins，Ig): 具有抗体活性及化学结构与抗体相似的球蛋白。 ●Ig的分布：分泌型存在于体液中,具抗体功能; 膜型作为抗原受体存在于B细胞膜上, 即BCR。 * * Nobel Prize winners Emil von Behring, 1901, antitoxins Paul Ehrlich , 1908, production of antibody Gerald Edelman and Rodney Porter, 1972, structure of antibody Georeges Kohler and Cesar Milstein, 1984, monoclonal antibody Susumu Tonegama,1987, structure of Ig gene * 第1节 Ig的结构 一、基本结构 ●四肽链Y形对称结构 ●重链和轻链 ●可变区与恒定区 ●铰链区 ●结构域 1. 重链和轻链（Heavy light chains） ●重链（heavy chain：H链）： ① 大约500aa, 糖基(+) ② 类别（class ）: H链：?