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第7章 微生物的生长和遗传变异;第一节 微生物的生长及其特性;生长:个体增大;
繁殖:个体数量增多
生长——细菌群体数量的增长,不是个体体积的增长。
提问:为什么这里不考察细菌个体的生长呢?
个体太小,难观察计量
群体细菌对环境产生影响
;一、 细菌生长的测定方法;细菌生长的测定方法;;;3.比例计数法; 4.比浊计数法; (1)制标准曲线(OD~No); (二)间接计数法(活菌计数法);; ;★一般计数平板的细菌生长菌落数以30~300个为宜。;(三)重量法; 1、称重法
用离心或过滤的方法将菌体从培养基中分离、冼净,称湿重或干重。 优 点:简单可靠。在活性污泥法中采用的指标:
(1)混合液悬浮固体(MLSS)(粗放测定)
(2)挥发性悬浮固体(MLVSS)(相对准确)
;2.细胞含N量法;3.DNA含量法;二、微生物的生长特性;(一)间歇培养和生长曲线 ;间歇培养中微生物的生长曲线;;细胞数量法(缓慢、对数、稳定和衰亡期); (1)缓慢期(停滞期);食物充分,微生物是生长不受食料数量的影响。细胞分裂速度最快、繁殖快,活力很强。微生物数目的对数与培养时间呈直线关系----对数生长阶段。; (3)稳定期;(4)衰亡期;衰亡期的长短与对数生长期一样在不同微生物中变化是很大的,主要与菌种的遗传特性有关。
通过补充营养和能源,以及中和环境毒性,可以减缓死亡期的细胞死亡速率,延长细菌培养物的存活时间。;(二) 连续培养;1.恒浊连续培养 ;2.恒化连续培养 ;第二节 微生物纯培养群体生长规律;保持细菌培养液浊度;三、微生物膜的生长特性;生物膜法是污水生物处理的一种方法。生物膜法采用各种不同载体,通过污水与载体的不断接触,在载体表面微生物细胞生长和繁殖,由细胞内向外伸展的胞外多聚物使微生物细胞形成孔状结构,称之为生物膜。污水利用生物膜的生物吸附和氧化作用,以降解去除污水中的有机污染物。脱落下来的生物膜与污水进行分离。;; 1、降解石油的超级细菌
2、耐汞质粒
3、降解燃料的质粒
质粒:在原核微生物和酵母中,除还存在着另一类较小的环状DNA分子,它们也携带少数遗传性基因。它们在细胞分裂中,也能进行复制,这样的DNA构造称为质粒。
;由于新的化学物质的不断发现,难降解污染物的增多,废水处理情况日趋复杂。带有降解某些物质质粒的微生物往往不一定能在某一废水环境中生存,而能在此种废水条件下生存的细菌又不一定具有降解其中某些物质的质粒,因而各国科学家正试图利用遗传工程,把具有降解某些特殊物质的质粒剪切后,连接到受体细胞中,使之带有一种或多种功能用以处理废水。这种用人工方法选出的多质粒、多功能的新菌种称“超级细菌”。;1.降解石油的超级细菌
将能降解脂(含质粒A)的一种假单胞菌作受体细胞,分别将能降解芳烃(质粒B)、芳烃(质粒C)和多环芳烃(质粒D)的质粒,用遗传工程方法人工转入受体细胞,获得多质粒“超级细菌”,可除去原油中2/3的烃。浮油在一般条件下降解需一年以上时间,用“超级细菌”只需几小时即可把浮油去除,速度快效率高。; 基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。;2.耐汞质粒
主要是某些微生物使水体汞元素甲基化形成甲基汞,使人及生物中毒。另一面自然界中存在一些耐汞的微生物,它们的耐汞基因在质粒R因子上。
例如,恶臭假单胞菌一般在超过2ug/ml汞浓度中即被毒死,查克拉巴蒂用质粒转移技术,把嗜油假单胞菌的耐汞质粒(MER质粒)转移到恶臭假单胞菌中去,后者获得MER质粒,可在50~70ug/ml氯化汞中生长。
3.降解燃料的质粒
假单胞菌K24,具有降解1号橙偶氮染料的质粒,假单胞菌K46,具有降解2号橙偶氮染料的质粒。将这两株假单胞菌通过质粒接合到一个菌株内,可获得具有分解两种偶氮染料功能的新菌种。;三、基因工程的生物安全性问题
我国作为一个农业大国、生物多样性大国,又是大豆、水稻等主要农作物的原产地,在发展生物技术的同时十分重视生物安全。对农业转基因生物采取“积极研究、慎重推广、加强管理、稳妥推进”的方针。
据了解,中国大陆目前正在进行研究的基因工程受体生物92种,而申报只有22种,从事此类研究的单位80多个,申报安全性评价的只有19个。
到目前为止,我国只有2部基因工程安全管理规章: 1993年12月国家科委发布的《基因工程安全管理办法》 1996年7月农业部发布的《农业生物基因工程安全管理实施办法》 ;;;一、转基因成果令人叹为观止; 现代基因工程的创始人P·伯格(美国,1926- )在1972年,把两种病毒的DNA连接了起来,获得重组DNA.;;2.转基因的重要成果; (2)基因制药方面:生物制药
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