2015全国生物奥赛辅导课件：氨基酸8970【精】课件.pptVIP

hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth ? ⊕ ⊕ ⊕ ⊕ 阳离子交换剂 平衡离子：阳离子 与正电荷混合物发生交换 ? ? ? ? ⊕ ? ⊕ ⊕ ⊕ ⊕ ? ? ? ⊕ 阴离子交换剂 平衡离子：阴离子 与负电荷混合物发生交换 基质 平衡离子 电荷基团 离子交换剂（固定相） * hrehtrhtrjr 调节相应氨基酸溶液的pH值，使相应氨基酸呈阳离子或阴离子。 选用阳离子交换树脂或阴离子交换树脂进行离子交换层析而分离得到相应的氨基酸。 如：pH值为3时，交换能力大小： 碱性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸 二、氨基酸 （二）氨基酸的分离和分析鉴定 1.根据氨基酸等电点不同为原理 （1）离子交换柱层析法 * hrehtrhtrjr 平衡离子带正电 样品中可能有正电、负电、中性基团 加样后，正电基团与平衡离子进行置换，结合上交换剂 负电基团和中性基团不能与交换剂结合，随流动相流出而被去除 随着洗脱液离子强度的增加，洗脱液中的离子可以逐步与结合在离子交换剂上的各种正电基团进行交换，而将各种正电基团置换出来，随洗脱液流出 与交换剂结合力小的正电基团先被置换出来，而与离子交换剂结合力强后被置换出来 最终，各种正电基团就会按其与离子交换剂结合力从小到大的顺序逐步被洗脱下来，从而达到分离目的。 以阳离子交换层析为例 ? ⊕ ⊕ ⊕ ? ? ? ⊕ ⊕ * hrehtrhtrjr 以阳离子交换层析为例 * hrehtrhtrjr 按载体种类不同 1.离子交换树脂：主要有聚苯乙烯树脂 阳离子交换树脂 强酸型：含磺酸基团 (R-SO3H) 中等酸型：含磷酸基团 (-O-PO2H4) 弱酸型：含酚基、羧基(-COOH) 阴离子交换树脂 强碱型：含季胺基团 [-N+(CH3)3] 弱碱型：含叔胺、伯胺基团[-N(CH3)2 ] 据所含交换基团的性质分: 阴离子交换树脂对化学试剂及热都不如阳离子交换树脂稳定。 * hrehtrhtrjr 2.离子交换纤维素 阴离子交换纤维素 —如:DEAE-纤维素 pH8.6以下分离中性或酸性物质，具二乙胺乙基 阳离子交换纤维素—如:CM-纤维素 一般pH4条件下使用，具有羧甲基 3.离子交换凝胶— 分离大分子物质 如：葡聚糖、聚丙烯酰胺、琼脂糖 * hrehtrhtrjr 二、氨基酸 （二）氨基酸的分离和分析鉴定 1.根据氨基酸等电点不同为原理 （2）沉淀法 调节溶液的pH值等于某种氨基酸的pI时，该氨基酸会由于静电引力的作用，溶解度最小，容易发生沉淀。 * hrehtrhtrjr hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hfththth hthyrthrth hft