生物工艺学实验（一）.PDF

生物工艺学实验（一） 胡佳俊 王锦华 上海大学生命科学学院 二 0 一八年十月 微生物工程实验室学生实验守则 为了保证实验教学的正常进行，特订立学生实验守则如下： 一、学生必需在完成预习后，方能进入实验室进行实验。 二、实验时不得大声喧哗和随意走动，以保持实验室安静。 三、听从教师指导，严格按操作规程和实验要求进行实验。 四、加强环保意识，实验废弃物必须存放在指定的容器内。 五、实验记录的数据必须由指导教师签收，实验报告在规定期 限内完成。 六、酸、碱、腐蚀性、有毒有害试剂须正确使用，规范操作， 谨防意外。 七、爱护公物，不随意挪动公用仪器设备，损坏仪器照章赔偿。 八、实验结束后，关闭仪器设备和水、电等，做好安全和清理 工作。 九、注意安全操作，发生意外时立即采取急救措施，并及时报 告教师和有关部门。 目 录 实验一.淀粉水解糖含量测定…………………………………………1 实验二.谷氨酸发酵液中谷氨酸含量测定……………………………4 实验三.氨基酸发酵及发酵条件试验…………………………………7 实验四.发酵液中谷氨酰胺的分析……………………………………9 实验五.离交法分离提取谷氨酸………………………………………10 实验六.糖化曲的制备及测定…………………………………………12 实验七.酒精发酵试验及测定…………………………………………14 实验八.柠檬酸发酵……………………………………………………16 实验九.柠檬酸的测定…………………………………………………17 实验十.紫外线诱变育种………………………………………………18 实验十一.NTG诱变育种………………………………………………20 实验十二.发酵产品提取的预处理实验………………………………22 实验十三.仿真谷氨酸发酵实验………………………………………24 实验十四.实验室发酵罐的操作技术…………………………………27 实验十五.降解纤维素的真菌菌种培养………………………………30 实验十六.等电点法氨基酸提取实验…………………………………32 实验一 淀粉水解糖含量测定 一. 目的和要求 1. 掌握工业生产中使用淀粉制葡萄糖的基本原理。 2. 学习和掌握淀粉水解的工艺流程及其测定方法。 二. 基本原理 淀粉是由数目众多的脱水葡萄糖单位（C H O ） ，经由糖苷键缩 6 10 5 n 合而成的多糖。由淀粉质原料生产葡萄糖，很早以来人们就采用无机 酸（通常用盐酸）为催化剂，在高温条件下使淀粉发生水解反应，转 变为葡萄糖。葡萄糖醛基在碱性溶液中可使高价铜还原成低价铜。当 高价铜量固定时，被样品中葡萄糖还原后，剩下的高价铜可用标准葡 萄糖溶液滴定借以定量样品中的葡萄糖（实际为还原糖总和）。 1. 水解：淀粉包括淀粉、戊糖、半纤维素（主要指多聚戊糖）用盐酸 加水分解转化成还原糖。 HCl (CH O ) + nH O nC H O 6 10 5 n 2 6 12 6 2. 中和：将余酸中和至 pH6～7，在碱性溶液中糖会分解，影响分析 结果。 3. 当斐林氏甲、乙液混合时，生成氢氧化铜沉淀。 CuSO + 2NaOH NaSO + Cu(OH) 4 4 2 氢氧化铜再与酒石酸