猪圆环病毒2型LAMP可视化快速检测方法的研究.PDF

上海农业学报　２０１６，３２（１）：２３２８ ＡｃｔａＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅＳｈａｎｇｈａｉ ＤＯＩ：１０．１５９５５?ｊ．ｉｓｓｎ１０００３９２４．２０１６．０１．０６ 文章编号：１０００３９２４（２０１６）０１０２３０６ ２ ＬＡＭＰ 猪圆环病毒 型 可视化快速检测方法的研究 １ ２，３ ４ ５ ５ ６ ７ ２，８ ， ， 　 ， 　 ， 　 ， ， ， 　 胡瑞丽 倪建平 赵 笑 赵 庆 史 斌 赵桓震 赵斌安 赵 凯 １ ２ （ ， ２００２３４； ， ２０１１０６； 上海师范大学 上海 上海市农业科学院生物技术研究所 上海 ３ ４ ５ ， ２０１１０６； ， ７５００２１； ， ２００２３３； 上海佳牧生物制品有限公司 上海 宁夏大学 银川 上海斯高勒生物科技有限公司 上海 ６ ７ ， ２０１５０１； ， ２０１１０６； 上海珺珏生物科技有限公司 上海 上海博满生物科技有限公司 上海 ８ ， ２０１１０６） 上海市农业遗传育种重点实验室 上海 　 ： ２ （ＰＣＶ２） 。 摘 要 本研究旨在建立有效的针对猪圆环病毒 型 的诊断技术及开发试剂盒 采用环介导等温 （ＬＡＭＰ） ２ （ＰＣＶ２）， ＰＣＶ２ ＯＲＦ２ ３ ， ＰＣＶ２ 扩增方法 检测猪圆环病毒 型 对 的 基因设计出 对特异性引物 扩增 基因 的最佳温度和时间优化到５９℃孵育５５ｍｉｎ。用该方法对临床样品进行检测，ＬＡＭＰ检测对ＰＣＶ２的检测限为１０ ?Ｌ， ＰＣＲ １０００ ?Ｌ， ＬＡＭＰ 。 拷贝 μ 而常规 检测法的检测限为 拷贝 μ 表明 检测法灵敏度高 该检测法不会与猪圆环 、 、 、 。 病毒 Ⅰ型 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪流行性腹泻病毒 传染性胃肠炎的猪病毒和轮状病毒发生交叉反应 用 ＬＡＭＰ １１００ ，９５０ 。 建立起的 检测法对 个临床样品进行检测 个样品被检测出为阳性样品 稳定性试验表明该试 ４０ 。 ，