曹建康-果蔬采后生理生化实验指导.doc

PAGE 果蔬采后生理生化实验指导 曹建康，姜微波，赵玉梅编著 中国农业大学 果蔬采后生理生化实验指导 PAGE III 目 录 TOC \o 1-3 \h \z \u 第一篇 基本实验操作原理 1 一、仪器的清洗、干燥和保管 1 二、称 量 3 三、取液与移液 6 四、溶液的配制 7 五、缓冲溶液的配制 9 六、溶液pH值的测定 14 七、离心技术 15 八、分光光度技术 17 九、样品的提取、分离、纯化和保存 18 十、蒸馏水的要求 22 十一、误差分析与数据处理 23 第二篇 果蔬采后生理生化实验技术 28 一、果蔬一般物理性状的测定 28 二、果实硬度的测定 29 三、可溶性固形物含量的测定 30 I．手持式折光仪测定法 30 II．阿贝折光仪测定法 32 四、可滴定酸含量的测定 34 五、果蔬汁液冰点的测定 36 六、果蔬组织含水量的测定 37 七、叶绿素含量的测定 38 八、抗坏血酸含量的测定 40 I．2,6-二氯酚靛酚滴定法 40 II．碘酸钾滴定法 43 III．分光光度计法 44 九、游离氨基酸总量的测定 46 十、总酚物质、类黄酮与花青素含量的测定 49 十一、果蔬呼吸强度的测定 50 I．碱液吸收法 51 II．气相色谱法 53 十二、贮藏环境中O2和CO2浓度的测定 55 十三、果蔬中可溶性糖含量的测定 58 I．苯酚-硫酸法 58 II．蒽酮试剂法 60 十四、果蔬中还原糖含量的测定 62 I．3,5-二硝基水杨酸法 63 II．斐林试剂滴定法 65 III．斐林试剂比色法 68 十五、果蔬中可溶性蛋白质含量的测定 70 I．考马斯亮蓝染色法 70 II．紫外吸收法 73 IV．Lowry法（劳里法） 75 十六、果蔬中淀粉含量及淀粉酶活性的测定 78 （一）淀粉含量的测定 78 I．酸水解法 78 II．碘-淀粉比色法 80 （二）淀粉酶活性的测定 82 十七、果胶物质含量及果胶酶活性的测定 85 （一）咔唑比色法测定果胶物质含量 85 （二）果胶酶活性测定 88 I．比色法 88 II．碘液滴定法 91 III．粘度降低法 93 十八、粗纤维素含量及纤维素酶活性的测定 93 （一）粗纤维含量的测定 93 （二）纤维素酶活性的测定 95 （三）β-葡萄糖苷酶活性测定 97 I．水杨苷水解法 97 II．对-硝基苯葡萄糖苷水解法 99 十九、果蔬中过氧化物酶活性的测定 100 二十、果蔬中多酚氧化酶活性的测定 103 二十一、果蔬中脂氧合酶活性的测定 105 二十二、果蔬组织乙烯生物合成代谢的测定 107 （一）乙烯释放量的测定 107 （二）ACC含量的测定 108 （三）ACC合成酶活性的测定 111 （四）ACC氧化酶活性测定 112 二十三、果蔬组织活性氧代谢的测定 114 （一）超氧阴离子产生速率的测定 114 （二）过氧化氢含量的测定 116 （三）过氧化氢酶活性测定 118 （四）超氧化物岐化酶活性测定 120 二十四、果蔬组织抗氧化代谢的测定 122 （一）还原型谷胱甘肽含量测定 123 （二）谷胱甘肽还原酶活性的测定 125 （三）抗坏血酸过氧化物酶活性的测定 127 二十五、果蔬组织乙醇发酵代谢的测定 129 （一）果蔬组织中乙醛、乙醇含量的测定 130 Ⅰ.气相色谱法测定乙醛、乙醇含量 130 Ⅱ.重铬酸钾氧化法测定乙醇含量 131 （二）丙酮酸含量的测定 133 （三）丙酮酸脱羧酶、乙醇脱氢酶活性的测定 135 二十六、果蔬中苯丙氨酸解氨酶活性的测定 137 二十七、果蔬中几丁质酶活性的测定 139 二十八、果蔬中β-1,3-葡聚糖酶活性测定 142 二十九、游离脯氨酸含量的测定 145 三十、果蔬细胞膜渗透率的测定 146 三十一、丙二醛含量的测定 148 三十二、果蔬蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 149 三十三、果蔬同工酶和可溶性蛋白质凝胶电泳 154 附 录 158 附录1. 常用缓冲溶液的配制方法 158 附录2. 实验室中常用酸碱的比重和浓度 164 附录3. 常用有机溶剂及其