电针调节Ras-RaF-MEK12-ERK12信号通路抑制软骨细胞凋亡的机制研究.docx

论文质量承诺书本人承诺：所交的学位论文均按答辩专家意见进行认真修改，文字和图表均无错误， 论文质量承诺书 本人承诺：所交的学位论文均按答辩专家意见进行认真修改，文字和图表均无错误， 内容真实可靠，并经导师审核确认，最后定稿、装订成册，论文书写和格式均按新修订 的《福建中医药大学关于研究生学位论文格式的规定》要求。本人愿意对论文的质量负 责，且文责自负。 专业：针灸推拿学 学号：1 120130002 承诺人签字-臌 2。压年5月厂善曰 导师承诺：本人已认真审核研究生的学位论文，该论文是在导师指导下由研究生完 成。并已按答辩专家意见进行修改，文字和图表均无错误，内容真实可靠．论文书写和 格式均按新修订的《福建中医药大学关于研究生学位论文格式的规定》要求。本人承诺 研究生所交的论文为最后定稿论文，并对论文质量负责： 导师签字： 20{S年5- 月／彦目 万方数据 学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行的研究工作 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行的研究工作 及所取得的研究成果。据我所知，除文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中 不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得福建中 医药大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出重要 贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并表示谢意。本人完全意识到本 声明的法律结果由 学位论文作者签名 签字日期：00／r车∥月∥日 权使用授权书 本学位论文作者完全了解福建中医药大学有关保留和使用学位论文的规定， 即：研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属福建中医药大学。学校 有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许学位论文被 查阅和借阅。本人授权福建中医药大学可以公布学位论文的全部或部分内容，并 编入有关数据库进行检索，可以允许采用影印、‘缩印或其它复制手段保存、汇编 学位论文(必威体育官网网址的学位论文在解密后遵守此规定)。 l、本学位论文属于(必须在以下相应方框内打“巾，否则一律按“非必威体育官网网址论文” 处理)： (1)必威体育官网网址论文：口本学位论文属于必威体育官网网址，在——年解密后适用本授权书。 (2)公开论文：翻本学位论文不属于必威体育官网网址范围，适用本授权书。 2、是否同意授权以下单位(必须在相应方框内打“小，否则一律按“同意授权” 处理)： 1、囱同意授权 口不同意授权 清华大学“中国学术期刊(光盘版)电子杂志社”将本人学位论文进行电子和网 络出版，并编入CNⅪ系列数据库(《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》和 《中国知t；!资源总库》)。 2、曰同意授权 口不同意授权 中国科学技术信息研究所将本人学位论文收录到《中国学位论文全文数据 库》，并 保留在其他媒体发表论文的权利。 本人签名 签字日期：2口／锋5月ig日 导师签名 签字日期泣孵5月／孑日 万方数据 卿目录 卿 目录 中文摘要 ．．IV Abstract ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ．．VI 前言 ． 1 第一部分理论探讨 3 第二部分TNF一Ⅱ诱导软骨细胞凋亡模型的建立及鉴定 ．．9 引言 9 1实验材料 一9 2实验方法与步骤 ．10 2．1软骨细胞的分离、原代培养 ．10 2．3．1 II型胶原免疫组织化学染色鉴定软骨细胞 ．．11 3 结果 ．1 1 3．1 软骨细胞的形态观察 ．11 3．2软骨细胞的II型胶原免疫组化鉴定 ．．12 4讨{仑 ．1 3 5 小结 ．1 5 第三部分 电针干预软骨细胞Ras—Raf-MEKl／2．ERKl／2信号通路的体外实 验研究 16 引言 1 6 2实验方法与步骤 1 7 2．1 电针后血清的制备 ．17 2．4 DAPI染色观测各组软骨细胞的凋亡 ．．1 8 3 结果 ．2l 3．1 电针后血清干预TNF．0t诱导软骨细胞活性的量效关系 21 3．2 电针后血清干预TNF．a诱导软骨细胞的形态观察 2l 3．4 电针后血清抑制TNF．a诱导软骨细胞的相关蛋白表达 22 4讨{念 ．24 5小结 ．26 结 论 27 参考文献 一28 II 万方数据 致谢 致谢 一36 文献综述 37 作者简历 ．．43 III 万方数据 中文摘要目的 中文摘要 目的 探讨电针调节Ras．Raf．MEKl／2一ERKl／2信号通路抑制软骨细胞凋亡的作用 机制。 方法 1．基于国内外的相关文献，以电针干预骨性关节炎的文献为研究对象，采用 综合一分析一归纳的方法，探讨电针调节骨性关节炎软骨细胞功能改变相关信号通 路及调控因子的可能作用机制。 2．清洁级4周龄SD大鼠，采用机械一II型胶原酶消化法获取膝关节软骨细 胞，并用TNF．0【诱导建立软骨细胞的凋亡模型，倒置相差显微镜观察软