FISH技术及临床应用.ppt

* Firstly, I would like to give some some background information of FISH. FISH is a process which vividly paints chromosomes or portions of chromosomes with fluorescent molecules It can identify the presence and location of a region of DNA within morphologically preserved chromosome preparations, then can identifies chromosomal abnormalities It is often used during M phase but is now used on interphase as well * M-FISH with chromosome banding specific probes * 8.间期FISH 三、 FISH优点（ Advantage）: less labor-intensive method for confirming the presence of a DNA segment within an entire genome than other conventional methods * FISH - a process which vividly paints chromosomes or portions of chromosomes with fluorescent molecules identify the presence and location of a region of DNA within morphologically preserved chromosome preparations, then can identifies chromosomal abnormalities often used during M phase but is now used on interphase as well * 四、FISH在医学中的应用举例 1、用已知探针检测未知CS畸变 * 2、用显微切割方法检测未知CS畸变 显微切割→PCR →CS特异探针 池(黄色荧光) →与正常人CS杂交 (例:2号染色体某段发黄色荧光) 结果？ * 3、产前诊断 例:检测间期细胞 内DNA分子数 例：21三体 例：18三体 * 4、植入前诊断 * Preimplantation Genetic Diagnosis (PGD) * 图示1例13/14罗式易位携带者的胚胎植入前FISH诊断 资料：一对6年不育，女，32岁，cs正常，男34岁，核型：45，XY,t(13;14)(q10;q10),并伴少、弱精。 采用单精子卵泡浆（intracytoplasmicsperm injection,ICSI)辅助授精，胚胎发育到3天6-8细胞期取出一个细胞进行双色FISH检测。 参图：用13q和14q探针，见核中2个13号（绿色）和2个14号（红色）信号细胞，表明？ * 移植后18周做羊水细胞CS检查 * PGD 5、肿瘤诊断 肿瘤诊断探针 检测间期细胞内DNA分子数 肿瘤细胞内有癌基因扩增 * * 肿瘤诊断 * 慢性粒细胞白血病 * 慢性粒细胞白血病 * 慢性粒细胞白血病 * 6.微小染色体畸变检测 * Microdeletion 7.遗传病诊断 （图） 例1： 家系1 FISH结果 用Xcs着丝粒探针 （绿色）和DMD exon46探针(红色） 杂交。 图示DMD男患者FISH 结果：只有Xcs着丝 粒绿色信号，无DMD exon46红色信号， 说明？ * 7.遗传病诊断 （图） * 图示：DMD男患者姐姐2条Xcs均有DMD Exon46信号(红色）。 表明？ 7.遗传病诊断 （图） * 图示：DMD男患者妹妹只有1条Xcs上有DMD Exon46信号。 表明？ 7.遗传病诊断 （图） * 例2： 家系2FISH结果 在DMD患者母亲1/3淋巴细胞中仅有1条Xcs上有DMD Exon46杂交信号，另一条上无。 7.遗传病诊断 （图） * 图示：在DMD患者母亲2/3淋巴细胞中在2条Xcs上有DMDExon46杂交信号。 A和B结果表明？ 7.遗传病诊断 （图） * 例3： 图示1复杂易位患者FISH结果（该患者致妻流产3次） 核型：46，XY，t（5；20；16）(q35;p13;q21) 三色FISH（5q绿色;1