仔猪副伤寒活疫苗生产用菌株生长曲线的建立及合成-中国兽药杂志.pdf

　２０１６，５０（２）：５１～５６／朱良全，等 中国兽药杂志 ·５１· 仔猪副伤寒活疫苗生产用菌株生长曲线的建立及 合成培养基初步应用 １ １，２ ２ １ １ ３ １ 朱良全 ，孙 晔 ，李聪研 ，蒋 卉 ，彭小薇 ，陈 祥 ，丁家波 （１．中国兽医药品监察所，北京 １０００８１；２．北京中海生物科技有限公司，北京 １０００８１； ３．江苏省人兽共患病学重点实验室，江苏扬州２２５００９） ［收稿日期］２０１５－１２－１９　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００２－１２８０（２０１６）０２－００５１－０６　［中图分类号］Ｓ８５９．７９７ ［摘　要］　建立了仔猪副伤寒活疫苗生产用菌株生长曲线，获取菌株培养参数，从而实现合成培养 基初步应用。将猪霍乱沙门氏菌（ＣＶＣＣ７９５００株）运用试管和三角瓶分别静置和振荡培养３０ｈ，期 间取４、８、１２、１８、２４、３０ｈ等６个点进行活菌计数并建立生长曲线，确定３７℃静置培养１８～２４ｈ， ３７℃、２００ｒ／ｍｉｎ振荡培养８～２４ｈ为培养稳定期。不同接菌量比较结果表明，３７℃静置培养２４ｈ， ３７℃、２００ｒ／ｍｉｎ振荡培养１２ｈ均可达到菌体稳定期。在稳定期参数条件下，比较合成培养基与常 规普通肉汤培养基对该菌的增殖效果，结果表明，３７℃静置培养２４ｈ，试管及三角瓶培养菌数分别 ８ ８ ８ ８ 为２７×１０～３１×１０、３３×１０～４１×１０ＣＦＵ／ｍＬ；３７℃、２００ｒ／ｍｉｎ振荡培养１２ｈ，试管及三角瓶培 ８ ８ ８ ８ 养菌数分别为５８×１０～６６×１０、７８×１０～８８×１０ＣＦＵ／ｍＬ。而同条件３批普通肉汤培养菌数均 低于合成培养基，且批次间稳定性较合成培养基差。将合成培养基振荡培养１２ｈ的菌液接种小鼠 均１０／１０存活；免疫后攻毒家兔达４／５～５／５保护，与普通肉汤基本一致。合成培养基保存期试验表 明，２５℃避光保存２８ｄ与当天配制的液体合成培养基，振荡培养菌数基本一致。获取的培养参数 适合用于合成培养基的初步评价，研制的合成培养基培养菌数优于普通肉汤，且不影响菌体安全性 及免疫原性，室温保存期可达２８ｄ。 ［关键词］　仔猪副伤寒活疫苗生产用菌株；培养参数；合成培养基 ＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆｔｈｅＧｒｏｗｔｈＣｕｒｖｅｏｆＰａｒａｔｙｐｈｏｉｄＬｉｖｅＶａｃｃｉｎｅＳｔｒａｉｎｆｏｒ ＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎａｎｄＩｔｓＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎＳｙｎｔｈｅｔｉｃＭｅｄｉｕｍ １ １，２ ２ １ １ ＺＨＵＬｉａｎｇ－ｑｕａｎ，ＳＵＮＹｅ ，ＬＩＣｏｎｇ－ｙａｎ，ＪＩＡＮＧＨｕｉ，ＰＥＮＧＸｉａｏ－ｗｅｉ， ３ １ ＣＨＥＮＸｉａｎｇ ，ＤＩＮＧＪｉａ－ｂｏ （１．ＣｈｉｎａＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８１，Ｃｈｉｎａ；２．ＢｅｉｊｉｎｇＺｈｏｎｇｈａｉＢｉｏｔｅｃｈＣｏ．，Ｌｔｄ， Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８１，Ｃｈｉｎａ；３．ＪｉａｎｇｓｕＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＺｏｏｎｏｓｉｓ，ＹａｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ，Ｊｉａｎｇｓｕ２２５００９，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ，ｗｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｔｈｅｇｒｏｗｔｈｃｕｒｖｅｏｆｔｈｅｐａｒａｔｙｐｈｏｉｄｌｉｖｅｖａｃｃｉｎｅｓｔｒａｉｎａｎｄｏｂｔａｉｎｅｄｔｈｅ ｐａｒａｍｅｔｅｒｆｏｒｂａｃｔｅｒｉａｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ，ｒｅｓｕｌｔｉｎｇｉｎｉｔｓａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｎｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｐａｒａｔｙｐｈｏｉｄｌｉｖｅｖａｃｃｉｎｅｕ