地中海贫血基因检测的临床应用课件.ppt

分型强 全新液相芯片技术简介 目前，国内地贫分子诊断方法主要有Gap-PCR、反向斑点杂交、导流杂交、测序等。其中Gap-PCR只能检测出α地贫中的缺失型，反向斑点杂交需要两次检测才能完整的检出α、β-地贫；导流杂交技术不能做到基因位点的准确分型；而测序方法需要昂贵的仪器，复杂序列分析，人工经验要求高，不利于大规模筛查。 国内现有地中海贫血基因检测技术及现状 α-地中海贫血 β-地中海贫血 亚能生物技术(深圳)有限公司 α-地中海贫血基因检测试剂盒(gap-PCR法) (国食药监械(准)字2012第3401088号 β-地中海贫血基因检测试剂盒(反向点杂交法) (国食药监械(准)字2013第3400676号 中山大学达安基因股份有限公司 α-地中海贫血基因检测试剂盒(gap-PCR法) (国食药监械(准)字2011第3401628号 β-地中海贫血基因分型检测试剂盒(PCR-反向点杂交法) (国食药监械(准)字2012第3401665号 珠海经济特区海泰生物制药有限公司 东南亚型α-地中海贫血Zeta链蛋白检测试剂盒(酶联免疫法) (国食药监械(准)字2011第3400228号 深圳益生堂生物企业有限公司 β地中海贫血基因检测试剂盒(PCR探针法) (国食药监械(准)字2012第3400354号 厦门致善生物科技有限公司 β-地中海贫血基因检测试剂盒(荧光PCR熔解曲线法) (国食药监械(准)字2013第3401294号 潮州凯普生物化学有限公司 α-和β-地中海贫血基因检测试剂盒(PCR+膜杂交法) (国食药监械(准)字2012第3400399号 北京现代高达生物技术有限责任公司 α-和β-型地中海贫血基因检测试剂盒(PCR-杂交法) (国食药监械(准)字2013第3401572号 地中海贫血检测试剂盒 现代高达 同类产品（Gap-PCR、膜杂交） 样本收集 样本收集 基因组DNA获取 基因组DNA获取 缺失和突变分2管进行PCR扩增 α缺失，α点突变和β点突变分别进行PCR扩增 多重微珠杂交（30min） Gap-PCR核酸电泳（1h） 膜杂交（2-4h） 自动化洗涤（5min） 人工洗涤（膜杂交） 电脑软件自动判读 人工判断，UV下观察α缺失突变 人工判读，2张膜条分别对α和β进行判读 同类产品操作流程对比 地中海贫血基因检测的临床应用 一、地中海贫血 * 全球有3.5亿人为地中海贫血基因携带者（占总人口的2%） 中国南方高发地区人群携带率最高可达到24% * 地中海贫血的地域分布 α-地贫分布 β-地贫分布 中国南方地贫基因携带率 地区 携带率(%) ? 地贫 β地贫 合计 广东 8.53 2.54 11.07 广西 14.95 6.78 21.73 四川 1.92 2.18 4.1 台湾 4.20 1.10 5.3 香港 5.02 3.41 8.43 Xu, et al. J Clin Pathol 2004, 57:517-22. Cai, et al. Chi J Epidemiol 2002,23:281-5. 在我国，地中海贫血主要在南方广东、广西、海南、四川、重庆等省市发病率较高，以广西、广东最为严重。 * 遗传性血红蛋白病三大类 ?地中海贫血 (地贫)（Thalassemias ） 常见为?-地贫 和? -地贫 ?异常血红蛋白病 珠蛋白结构异常，绝大部分没有或有轻度临床诊断 ?遗传性持续性胎儿血红蛋白 珠蛋白的合成不随着胎儿的发育而发生改变，胎儿血红蛋白持续表达。 地中海贫血定义及分类 地中海贫血（Thalassemia）简称地贫（Thal），是由于血红蛋白的珠蛋白肽链基因突变或缺失，使某种珠蛋白肽链合成障碍而致的一种遗传性慢性溶血性贫血。 血红蛋白分子是由珠蛋白+血红素组成，珠蛋白由两对（4条）肽链构成。 根据珠蛋白肽链基因（简称α基因或β基因）缺失、缺陷或基因突变和珠蛋白肽链合成障碍的不同，可将地贫分为α型、β型、δβ型和δ型四种，其中以α型和β型地贫较为常见。 地中海贫血定义及分类 人类血红蛋白的合成和演变 胚胎期 胎儿期 成人 gower 1- ζ2ε2 gower 2- α2ε2Portland- ζ2γ2 HbF- α2γ2 HbA- α2β2 HbA- α2β2 HbA2- α2δ2 HbF- α2γ2 地贫血红蛋白的组成 正常成人血红蛋白（Hb）有三种：HbA(α2β2)( 2.5—3.5%)、HbA2(α2δ2)(96.5-97.5%)、HbF(α2γ2)(0-1.0%)。 α地中海贫血及基因型