手性药物分离分析技术概况课件.ppt

手性药物分离分析技术概况;手性药物概念; 自然界存在各种各样的手性现象。在机体的代谢和调控过程中所涉及的物质，比如蛋白质、氨基酸、多糖、核酸、酶等重要基础物质，都是手性的，都具有极强的手性识别能力。在这样一个手性环境中，手性药物在生物体内的吸收、分布、代谢和排泄均体现出立体选择性，手性药物的不同对映体间往往显示出不同的药理学和毒理学特性以及不同的药代动力学性质。 ; 当前大多数药物是以外消旋体的形式出现。但在美国FDA，欧盟和日本相继采取了相应措施规范手性药物市场之后，近年来单一对映体药物市场每年以20%以上的速度增长。手性拆分成为了热门的研究课题。 ;手性药物的分离分析技术;手性药物分离分析技术;HPLC;CMPA法;优点与不足;常用的手性流动相添加剂; GSP法 ;常用的手性固定项;CDR法 ;气相色谱(GC) ; GC手性固定相按照拆分机制可分为三类:一、基于氢键作用的手性固定相 二、基于配位作用的手性金属配合物固定相 三、基于包含作用的环糊精衍生物固定相 ; 第一类主要是氨基酸衍生物固定相，这类手性固定相中含有酰胺基或羧酸酯基，可以与手性药物分子中的活泼基团通过氢键作用缔合，形成非对映异构体缔合物。由于立体因素和氢键作用的不同，所形成的非对映异构体缔合物的稳定性也不同，导致对映体通过色谱柱所需时间不同而将它们分离开。 ; 基于配位作用的手性金属配合物固定相，一般要求被分析物有二电子或孤对电子，分离机制主要基于二相互作用，可以用来拆分低沸点手性化合物如烯、醇、醚、酮以及昆虫信息素和香精油等。 ; 基于包含作用的环糊精衍生物固定相在GC手性分离研究中发展最快，其选择性高，应用也广。一般认为环糊精固定相的拆分机制是由于环糊精特殊的笼状结构，可与对映体形成非对映的包含物而达到拆分的目的。 ; 尽管气相色谱是开发得较早的一种分离对映体的色谱手段，但它存在着一些固有的局限性，如要求分析样品具有一定的挥发性和热稳定性。一般说来，气相色谱要实现制备比较困难。 ;毛细管电泳手性分离(CE) ;1.毛细管区带电泳(CZE) CZE又称毛细管自由电泳，是CE中最基本最普遍的一种模式。各类手性选择剂加入缓冲液中可实现多种手性异构体的分离，且机理也各不相同。 2.非水毛细管电泳(NACE) 非水毛细管电泳(NACE)是近几年才发展起来的毛细管电泳的一个分支，由于它有优于传统水相毛细管电泳的许多特点，因此广泛的应用于手性化合物的分离分析工作中。非水毛细管电泳是以有机溶剂为流动相，在毛细管中进行分离的分析技术。NACE适用于以下几个方面:(l)分析不易溶于水、易溶于有机溶剂的物质;(2)分离在水基流动相毛细管电泳中淌度十分相似的物质;(3)研究水中难以进行的反应。; 常用手性选择剂有环糊精、冠醚、手性混合胶束、手性纤维素、蛋白质、糖类、大环抗生素等。其中环糊精特别是六聚体环糊精(β—CD)以其分子大小适中、价格便宜被广泛应用，尤以衍生化的β—CD为最。 目前毛细管电泳分离方法的讨论主要集中在各种手性添加剂与对映体药物的匹配以及具体实验中条件最优化选择上。随着各种具体方法的成熟，CE在现实中的应用会更广泛。 ;超临界流体色谱(SFC) ; 色谱柱类型分填充柱和毛细管柱两种。常用的手性固定相有环糊精聚硅氧烷键合相、金属配合物固定相、酞胺和氨基酸固定相、多糖类固定相等。 ;手性毛细管电色谱拆分法（CEC） ; 目前CEC进行手性药物对映体拆分主要有以下3种方式。 1.非手性固定相结合手性添加剂流动相 手性选择作用依靠流动相中添加的手性选择剂产生。 2.采用手性固定相 固定相上键合手性选择剂(如环糊精、蛋白等)。 3.采用手性分子烙印固定相 用其进行记忆性、专一性分离最近,分子烙印技术已开始引用于手性分离。 ;总结; 谢谢