液相色谱脉冲安培电化学法测定硫酸卡那霉素中各组分含量.pdf

维普资讯 第35卷 分析化学 (FENXIHUAXUE) 研究简报 第5期 2007年 5月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry 703～706 液相色谱．脉冲安培 电化学法测定硫酸卡那霉素中各组分含量 习玲玲 朱 岩 (浙江大学西溪校区化学系，杭州 310028) 摘 要 建立了一种用反相离子对液相色谱 (LC)分离，以金电极为工作电极的脉冲安培电化学法 (PAD)直 接检测硫酸卡那霉素中主要组分及杂质含量的分析方法。流动相为0．033mol／L草酸 、0．012mol／L七氟丁 酸、105mL／L乙腈，用稀 NaOH调节pH至3．4。考察了各色谱参数对分离测定的影响。实验证明，本方法不 需要衍生化，可直接检测硫酸卡那霉素。与报道的其它方法相比，本方法不仅能使硫酸卡那霉素中的卡那霉 素A、B得到了很好的分离，还分离出了其它一些未能确证的组分。如用质谱法等对未知组分进行确证后，对 硫酸卡那霉素原料药、注射液 、滴眼液及兽药等实际样品中的卡那霉素各组分进行测定。可望成为一种标准 分析方法。 关键词 硫酸卡那霉素，液相色谱 ，脉冲安培电化学检测 1 引 言 临床使用的卡那霉素是多组分复合物，卡那霉素A是主要成分，另外还含有卡那霉素B、C和D等 次要组分 ¨(如图1)。由于各组分的毒性和抗菌能力均有一定的差异，因此复合物中各组分相对含量 的变化关系着产品的疗效和毒副作用。对该药中各 一 … -- NH2 OH NH2 m 药物疗效等方面具有重要的现实意义。卡那霉素各 B… … … 组分和杂质结构相似 ，理化性质相近 ，多用色谱法 良2 OH NH。 NH。 ， 分离后分别进行检测。国外药典大都使用微生物效 … 价法 ，国内主要用分光光度法 和旋光法 等进 图1 卡那霉素各组分及其结构 行检测。而这些方法共同的缺点是专属性差，测定 Fig ． 1 Strutu 。fkanamy i 。mp。。 t 的是各组分和杂质的总效价或总含量。 目前采用 比 较多的是衍生化高效液相色谱法 ，但该方法操作繁琐 、耗时，且实验结果影响因素多，准确性差。2005 版中国药典 (二部) 采用液相色谱一蒸发光散射法(ELSD)直接测定卡那霉素，但该方法的缺点是流动 相只能使用挥发性洗脱液，灵敏度低，选择性差。 另一种无需衍生化的直接检测法是脉冲安培检测法 (PAD)。在高 pH溶液中，含有脂肪氨基 (一NH )和羟基(一0H )的化合物可在金电极上被氧化，因此可用电化学法检测。然而，由于金电 极吸附待测成分的氧化产物以及金电极表面形成氧化层(AuO)，金电极会很快失活。为了解决这一问 题，发展了脉冲安培检测器，由3个不同的脉冲电位代替直流安培电化学检测器中的加在工作电极上的 恒定电位。比工作电位(E。)高的正电位(E：)用来除去金电极上被测成分的氧化产物。由于金电极本 身会部分被氧化成氧化金(AuO)，再加一个大的负电位 (E，)，使氧化金还原到还原状态 (Au)，从而恢 复金电极活性。该脉冲每0．5～1S循环一次。 国外关于液相色谱．脉冲安培电化学检测法用于氨基糖苷类抗生素中各组分及杂质的含量测定已 有许多报道 ’m]，有的已成为标准分析方法…]。但