食品安全分析课件(PPT 54页).ppt

根据上述性质，测定水溶性维生素时，一般都在酸性溶液中进行前处理。 维生素Bl、B2 盐酸水解 酶解 提取 纯化 维生素C通常采用草酸、草酸—醋酸、偏磷酸—醋酸溶液直接提取。在一定浓度的酸性介质中，可以消除某些还原性杂质对维生素C的破坏作用。草酸价廉，使用方便，对维生素C有很好 淀粉酶 木瓜蛋白酶 活性人造浮石 硅镁吸附剂 一、维生素B1的测定 维生素B1又名硫胺素、抗神经炎素，通常以游离态，或以焦磷酸酯形式存在于自然界。在酵母、米糠、麦胚、花生、黄豆以及绿色蔬菜和牛乳、蛋黄中含量较为丰富。 分析方法：GB/T 5009.84—2003中唯一的方法是荧光计法 此法检出限0.05μg 1、原理 硫胺素在碱性铁氰化钾溶液中被氧化成硫色素（噻嘧色素），在紫外线下，硫色素发出荧光。在给定的条件下，以及没有其他物质干扰时，此荧光强度与硫色素量成正比，即与溶液中硫胺素量成正比。从而测定其含量。 2、分析步骤 制样→水解→净化→氧化→干燥→测定→结果计算 （1）提取 精确称取一定量试样5－20g（硫胺素含量约为10－30ug）置于100mL三角瓶中，加入50－75mL 0.1mol/L或0.3mol/L盐酸使其溶解，瓶口加盖小烧杯后放入高压锅中加热水解10.3 ×104Pa 30min,凉后取出。 用2mol/L乙酸钠调其pH值为4.5（以0.04%溴甲酚绿为指示剂） 按每克试样加入20mg淀粉酶的比例加入淀粉酶。于45－50℃温箱过夜保温（约16h）。 冷至室温，定容至100mL，然后混匀过滤，即为提取液 （2）净化 用少许脱脂棉铺于层析柱的底部，加水将棉纤维中气泡排出，再加约1g活性人造沸石使之达到交换柱的三分之一高度。保持层析柱中液面始终高于活性人造沸石。 用移液管加入提取液20－80mL（使通过活性人造沸石的硫胺素总量约为2－5μg） 加入约10 mL热水冲洗交换柱，弃去洗液。如此 重复三次。 加入25％酸性氯化钾（温度为90℃左右）20mL，收集此液于25mL刻度试管内，冷至室温，用25％酸性氯化钾定容至25mL,即为试样净化液。 将20mL硫胺素标准使用液加入交换柱以代替样品提取液，即得到标准净化液。 （3）氧化 将5mL试样净化液分别加入A、B两个反应瓶。 在避光暗环境中将3mL 15% 氢氧化钠加入反应瓶A，振摇约15s，然后加入10mL正丁醇；将3mL碱性铁氰化钾溶液加入反应瓶B, 振摇约15s，然后加入10mL正丁醇；将A、B两个反应瓶同时用力振摇，准确计时1.5min。 重复1－2，用标准净化液代替试样净化液。 用黑布遮盖A、B反应瓶，静置分层后下层碱性溶液，加入2－3g无水硫酸钠使溶液脱水。 （4）荧光强度的测定 荧光测定条件： 激发波长 365nm；狭缝 5nm. 发射波长 435nm；狭缝 5nm. 依次测定下列荧光强度： 试样空白荧光强度（试样反应瓶A）； 标准空白荧光强度（标准反应瓶A）； 试样荧光强度（试样反应瓶B）； 标准荧光强度（标准反应瓶B）。 二、维生素B2的测定 维生素B2即核黄素，在食品中以游离形式或磷酸酯等结合形式存在。膳食中的主要来源是各种动物性食品，其中以肝、肾、心、蛋、奶含量最多，其次是植物性食品的豆类和新鲜绿叶蔬菜。 分析方法： GB/T 5009.85—2003中第一法为荧光法；第二法为微生物法。 1、原理 核黄素在440-500nm波长光照射下发生黄绿色荧光，在稀溶液中，荧光强度与核黄素浓度成正比。在波长525nm下测定其荧光强度。试液再加入低亚硫酸钠(Na2S2O4),将核黄素还原成无荧光的物质，然后再测定试液中残余荧光杂质的荧光强度，两者之差即为食品中核黄素所产生的荧光强度。 章维生素的测定 第一节 概 述 维生素是维持人体正常生命活动所必需的一类天然有机化合物。其种类很多，目前已确认的有30余种，其中被认为对维持人体健康和促进发育至关重要的有20余种。 人体如从膳食中摄入维生素的量不足或者机体由于某种原因吸收或合成发生障碍时，就会引起各种维生素缺乏症。近几年已经查明仅有少数几种维生素可以在体内合成，大多数维生素都必须由食物供给。 维生素的分类 1、脂溶性维生素： 能溶于脂肪或脂溶剂，在食物中与脂类共存的一类维生素，包括A、D、E、K，其共同特点是摄入后存在于脂肪组织中，不能从尿中排除，大剂量摄入时可能引起中毒。由于可储藏在脂肪中，故不需每天供给。 2、水溶性