生物制药预习题整理版.doc

红色大题 其它小题 疫苗的鉴定技术： 1血凝抑制实验 血凝抑制试验:一种测定抗原或抗体的技术血凝现象：有血凝素的病毒能凝集人或动物红细胞血凝抑制试验，血凝现象被相应抗体抑制 原理：抗体与血凝素结合，封闭血凝素，使之不能与红细胞结合，称为红细胞凝集抑制(HI)反应，也称血凝抑制反应 。 2单向免疫扩散 单向免疫扩散试验原理；单向免疫扩散在含有特异抗体的琼脂板中打孔，并在孔中加入定量的抗原，当抗原向周围扩散后与琼脂中抗体相结合，即形成白色沉淀环，其直径或面积与抗原浓度呈正相关。 3酶联免疫吸附测定，是指利用抗体分子能与抗原分子特异性结合的特点，将游离的杂蛋白和结合于固相载体的目的蛋白结合，并利用特殊的标记物对其定性或定量分析的一种检测方法。 其原理是：抗原或抗体能物理性地吸附于固相表面，并且保持其免疫活性；抗原或抗体能与酶通过共价键形成酶结合物，同时保持各自的免疫活性或酶活性；酶结合物与相应的抗原或抗体结合后，能通过加入底物的颜色反应来确定免疫反应的发生，颜色反应的深浅与标本中相应抗原或抗体的量成正比将 分类：间接法、夹心法、竞争法 单克隆抗体制备： 1.制备抗原：获得免疫B淋巴细胞，骨髓瘤细胞 2 PEG诱导细胞融合，获得杂交细胞； 3.选择培养，选择性培养基为HAT培养基筛选出杂交瘤细胞； 4.抗原抗体检测，筛选出产生目的抗体的单个杂交瘤细胞； 5.优化培养 6.纯化单克隆抗体，大量制备。 疫苗类型 1减毒活疫苗 优点： 接种次数少，反应小，免疫效果好成本低 缺点：稳定性差，免疫缺陷者不能接种 常用类型：卡介苗，天花疫苗，狂犬疫苗，脊髓灰质炎 2灭活疫苗 失去了病原体的感染性，但保留了较强的免疫原性和较好的安全性。较稳定，易保存，需要多次接种，剂量大；维持时间较短，免疫缺陷者可用 流感病毒：甲型乙型丙型 常见甲型 3基因重组亚单位疫苗 ;乙肝疫苗 4联合疫苗 百日破 5核酸疫苗r/dna 6治疗性疫苗 狂犬疫苗 克隆真核基因常用方法：逆转录法和化学合成法,PCR法、cDNA文库法、基因组DNA文库法。 糖尿病的类型及治疗 I型糖尿病：胰岛素依赖性，自身免疫机制引起胰岛细胞严重破坏,胰岛素水平降低。胰岛素注射可以降低血糖。治疗：注射外源胰岛素 II型糖尿病：非胰岛素依赖性，胰岛细胞功能低下，胰岛素相对缺乏与胰岛素抵抗。胰岛素注射不能降低血糖，机体对胰岛素不响应， 二甲双胍作为II型糖尿病的初始降糖药物 降低血糖 降低心血管疾病风险 降低肝脏合成更多的葡萄糖 促进各个组织对葡萄糖的利用 生物技术或者基因工程制药制备的基本过程 一获得目的基因二组建重组质粒三构建工程菌或者细胞四培养工程菌五分离纯化产物六除菌过滤七半成品鉴定八成品鉴定九药品进行包装 动脉粥样硬化及其过程：是动脉粥样硬化斑块内出现的特征性病理细胞。泡沫细胞堆积在动脉内壁，形成动脉粥样硬化。 LDL可促进动脉粥样硬化的形成；HDL可抵抗动脉粥样硬化。 过程：动脉粥样硬化主要分为; 1脂肪酸在体内被氧化变成游离的脂肪酸FFA 2类皮下脂质颗粒的蓄积与修饰： 3核细胞的粘附与迁移 4末细胞的形成移至内皮下的单核细胞，随后分化为巨噬细胞，修饰的LDL颗粒在该过程中起着重要的。 体外培养细胞分类： 贴壁细胞 悬浮细胞 兼性贴壁细胞 生产用动物细胞的种类 原代细胞 传代细胞系 转化细胞系 工程细胞系 原代细胞 传代细胞系 动物细胞的大规模培养 1悬浮培养法：细胞在培养液中呈悬浮状态生长繁殖的培养方法。 2微载体培养法：使细胞吸附于微载体或者微珠表面（生产重组蛋白、使贴壁细胞培养兼有悬浮培养和固定化培养的优点） 3多孔载体培养法：使细胞吸附于多孔载体上培养（固定培养+贴壁培养，避免机械损伤、多孔载体对细胞无毒害，具有机械稳定性和热稳定性、研究细胞之间的信号通讯）。 （3D细胞培养：微流控法制备多孔微载体优势：对细胞无毒害，具有机械稳定性和热稳定性，固定培养+贴壁培养，避免机械损伤 ） 4微囊化培养法：把细胞包裹在微囊里进行悬浮培养（生产单克隆抗体，干扰素、糖尿病和癌症的药物研发）。 5中空纤维培养法：三维结构，在细胞与细胞之间存在着毛细血管，可以输送生长代谢所需要的营养; 生产生长激素、单克隆抗体。 两种实例细胞 EPO（促红细胞生成素）；是由肾脏和肝脏分泌的一种激素样物质，能够促进红细胞生成。能促进肌肉中氧气生成。用于治疗慢性肾衰患者的贫血症。 CHO中国仓鼠卵巢细胞；是一种实验室常见的贴壁细胞系 RNA干扰；是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。 RNA干扰的机制基因沉默 转录水平的基因沉默 转录后水平的基因沉默 固定化酶的方法 生物制药技术主要技术范畴