复习单克隆抗体的过程讲义.ppt

复习单克隆抗体的过程;温故知新：; 植物细胞工程： 植物组织培养（细胞的全能性） 植物体细胞杂交 （细胞的全能性、细胞膜的流动性） 动物细胞工程： 动物细胞培养（细胞增殖） 核移植（动物细胞核的全能性） 动物细胞融合（细胞膜的流动性） 单克隆抗体 （细胞膜的流动性、细胞增殖）;传统的抗体生产方法及缺陷;单克隆抗体;一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖;浆细胞;①细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。 ②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。 ③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但能不断分裂增殖。 你想到筛选杂交瘤细胞的方案了么？ ; 在培养基中加入氨基嘌呤，收集增殖细胞！;; 通常采用有限稀释法，将筛选出来的杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔细胞培养板上培养，使每孔细胞不多于一个，再由这些单细胞克隆生长，然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。;;如何得到大量的单克隆抗体？;单克隆抗体;特定的选择培养基;高考热点：;5.整个制备过程为何要经过两次筛选?;科勒;4、单抗隆抗体的应用;单克隆抗体的制备;(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自小鼠体内的 细胞，从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射_____________类物质。 （2）d过程是一个_____________过程，该过程的进行常用_____________或_____________的诱导。 (3)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成 种类型的C细胞，因此需用__________培养基筛选出D细胞用于培养，D细胞的名称是 ，其特点是_________________________________________。;(4)在培养时通过________分裂方式大量繁殖。D细胞体外培养需要注意的条件是（要求答5项）__________________________________。 （5）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是_________________。;15、（1）单克隆抗体是指 。 ;（3）大量制备单克隆抗体的方法主要有两种： ①体外培养法，可获得10μg/mL的抗体；②动物体内诱生法可获得5~20mg/mL的抗体。你选择的方法及原因是 。