实验二血涂片制备白细胞分类计数讲义.ppt

实验二血涂片制备白细胞分类计数; 涂片技术是制备血液样品最常用的技术。将血液样品制成单层细胞的涂片标本，染色后可对血液中各种细胞形态进行形态观察、细胞计数、细胞大小测量等工作。 ;;方法与步骤;再取另一张边缘光滑的双凹片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状。;;30~45°;血涂片;;实验用品;瑞氏染色原理; 甲醇的作用可使ME溶解，解离为M+和E－，这两种有色离子可以选择性地吸附血细胞内的不同成分而着色。 各种细胞及细胞的各种成分由于其化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样，因此，在血片上可以见到不同的着色。细胞中碱性物质与酸性染料伊红结合染成红色 ；细胞中的酸性物质可与染液中的碱性染料美蓝结合染成蓝色 ；当细胞含酸、碱性物质各半时，它们既与酸性染料作用，又与碱性染料作用，染成淡紫红色。 ;;染色;血涂片的观察;体尾交界处;各类成熟白细胞的形态学： ;嗜酸性粒细胞（Eo）：较中性粒细胞稍大，胞核多为两叶，呈眼镜、八字形，核染色质粗糙染深紫红色，胞浆内充满粗大均匀的嗜酸性颗粒，瑞氏染色时呈桔红色，有折光性。 ;嗜碱性粒细胞（Ba）：胞浆中含有大小不等的嗜碱性颗粒，瑞氏染色时呈兰黑色。于光学显微镜下常见胞浆中有小空泡，乃因嗜碱性颗粒易溶于水或因功能活动而脱颗粒所致；核呈淡紫红色常看不清，呈杆状或分叶状。 ;淋巴细胞（Ly）：胞体呈圆形，直径介于6～15μm之间，在成人血涂片中以小淋巴细胞为多见，直径6～9μm，核大呈深紫色致密而浓染，胞浆量极少；大淋巴细胞胞浆量较多，呈清澈的淡蓝色，可见少量嗜苯胺蓝颗粒，胞核圆或椭圆，常偏向细胞一侧，染色较深。 ;单核细胞（Mo）：在瑞氏染色涂片上为12～20μm，胞体圆形、椭圆形或不规则形；核形多种多样，最重要的特点是染色质较细致疏松，呈丝网状或条缕状，着色较淡胞浆较多，淡兰色，含大量细小尘土样颗粒。;中性粒细胞;涂片制备的注意事项 染色操作注意事项 染色质量的控制