湖工细胞工程1绪论.ppt

细胞工程的发展 动物细胞工程发展 植物细胞工程的发展 细胞工程-简介 1859年，法国解剖学家Vulpian最早尝试将蛙(Rana)胚尾部组织切下，放到普通水中“培养”，观察到组织的生长和分化现象； 1903年，Jolly用盖片悬滴法将蝾螈(Ambystoma maculatum)白细胞培养了将近一个月。 1906年，Beebe和Ewing用动物血清作培养基，将狗(Canis familiaris)淋巴肉瘤细胞培养2h，并观察到细胞生长现象。 1907年，Harrison在无菌条件下，从蝌蚪的脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养，开创了动物组织培养的先河。 动物细胞工程发展——探索期 细胞工程-简介 19世纪30年代，Muller（马勒）, Schwann, Virchow等相继在肺结核、天花、水痘、麻疹等病理组织中观察到多核细胞现象； 1849年Lobing（罗宾）在骨髓中也发现了多核现象的存在； 1855年-1858年，科学家们在肺组织和各种正常组织及发尖和坏死部位都发现了多核细胞； 1859年，A. Barli在研究黏虫生活史时发现，某些黏虫存在着由单个细胞核融合形成多核的原生质团的情况。 据此，他认为多核细胞是由单个细胞彼此融合而形成的。至此，自然界中广泛存在着多核细胞的事实，才被生命科学工作者接受。 细胞工程-简介 动物细胞工程发展——细胞融合现象的发现 1907年，Harrison（哈里森）首先利用盖玻片悬滴培养蛙胚神经管区细胞，并观察到从中生长出的轴突细胞（神经纤维），他的工作被认为是动物细胞培养开始的标志； 1911年，Carrel发现了鸡胚浸出液对于培养细胞的生长促进作用，并首次把无菌技术引入组织培养技术中。 1914年，Thomson建立了器官培养技术。 1923年，Carrel设计了卡氏培养瓶。Carrel把外科手术的无菌操作观念带到了细胞体外培养实验中，在解决细胞培养的营养和污染方面作出了贡献。0年，1951年，Earle和Gay分别建立了C3H细胞系的L系和Hela细胞系。 A.Carrel 细胞工程-简介 动物细胞工程发展——动物细胞技术的建立 1958年, Okada发现紫外灭活仙台病毒可引起艾氏腹水瘤细胞彼此融合。 60年代，Harris(1965)诱导不同动物体细胞融合获得成功并培养存活。 Lifflefield(1964)根据亲本细胞的酶缺陷型，利用HAT选择性培养基能使亲本细胞死亡而只留下异型融合细胞，并能不断地增殖，从此形成了细胞融合到杂种细胞选择、培养的一整套技术。 1975年，免疫学家Kohler和Milstein利用仙台病毒诱导绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，选择到能分泌单一抗体的杂种细胞。该杂种细胞具有在小鼠体内和体外培养条件下大量繁殖的能力，并能长期地分泌单克隆抗体，从而建立了小鼠淋巴细胞杂交瘤技术。 细胞工程-简介 动物细胞工程发展——细胞融合技术的建立和杂交瘤技术的诞生 1962年，英国学者Grudon把非洲爪蟾(zhua chan)小肠上皮细胞的核注入同种或异种非洲爪蟾未受精卵(经紫外线照射杀死卵细胞核)中，约有1％的重组卵发育成为成熟蛙。 组装鼠，绵山羊。 1997,哺乳动物 — 克隆羊多利诞生。 转基因克隆猪。 转基因鱼，试管婴儿。 动物器官克隆为生物医学材料开辟新途径。 细胞工程-简介 动物细胞工程发展——动物克隆技术的建立 国内动物细胞工程的研究现状 1、单克隆抗体 2、家畜胚胎移植 3、核移植技术 5、胚胎干细胞 4、转基因动物技术 细胞工程-简介 单克隆抗体 近几年来，淋巴细胞杂交瘤技术发展很快。至1985年底，已研制成功了抗胃癌、抗肺癌、抗乙型肝炎表面抗原、抗疟疾、抗丝虫等47类单克隆抗体。其中，抗乙型肝炎病毒单克隆抗体已投入了临床应用，创造了一定的经济效益。 细胞工程-简介 农用单克隆抗体研究，已研究制成一大批单克隆抗体试剂盒：马传染性贫血、猪瘟、鸡新城疫、草鱼出血病等，并应用于动物疫病的快速诊断。 在家畜胚胎移植技术方面，中国科学院遗传研究所以及其它农业科研机构等单位已取得了一些成果。山东省农业科学院在兔胚移植研究方面已初获成功。西北农业大学研究生张涌（1987），中国农业科学院朱裕鼎领导的课题组（1987年）利用胚胎切割技术繁殖半胚绵羊获得成功。 家畜胚胎移植 细胞工程-简介 我国利用移核技术培育新型鱼已获得实际应用成果。 3、核移植技术 生长快、质量好，增重速率比亲本荷包红鲤快20％，而且蛋白质含量高，具有一定的经济效益。 荷包