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棉花培养方法
发芽:
挑选籽粒饱满的棉花种子用纱布包好,放入玻璃杯,加适量80℃的热水,封口,室温放置两小时;
用蒸馏水冲洗两遍,包好,放入玻璃杯,加少量蒸馏水,润湿纱布即可,封口,放入光照培养箱1~2天;
培养箱设置为:白天,温度28℃,湿度80%,时间12h;晚上,温度26℃,湿度60%,时间12h;
沙培:
待种子露白,将其移入沙子,深约2~3cm,间距5cm左右,用沙子覆盖;放入光照培养箱约3~5天(培养箱设置如上)。注:沙子不能太干,也不能有积水;
水培:
待棉花苗长到6~10cm,选择大小比较一致的苗,用于水培。将外部涂上黑漆的方盒中倒入营养液,用打有小孔的方板盖上(直径3cm,间距10cm),将棉花苗置于孔中(可用海绵裹住茎部),根部没入营养液中,通入空气;放于培养架上,温度23~26℃,光照15小时,黑夜9小时;
培养16~18天,期间约7天换一次营养液(要保证营养液没过根部),待长出3~5片真叶,开始处理。
处理方法:上午9点,选择长势一直的两盒苗,倒掉营养液,其中一盒加入100mM的NaCl溶液,另一盒加入蒸馏水作为对照,都没过根部,分别处理1h、3h、6h、24h取材,根茎叶分开取(根部用吸水纸吸干,叶子只取真叶),分别用标记好的铝箔纸包好,放入液氮中速冻,待冻透后-80℃保存。
附:
棉花水培营养液配方:
棉花水培的营养液配方(原液)
化合物名称
化合物分子式
浓度(mmol/L)
原液g/L
硼酸
H3BO3
0.02
1.2366
硫酸锌
ZnSO4.7H2O
0.001
0.28754
硫酸铜
CuSO4.5H2O
0.0002
0.049936
硫酸锰
MnSO4.H2O
0.001
0.16901
钼酸铵
(NH4)6Mo7O24.4H2O
0.000005
0.0061779
以上为微量
原液g/L
硝酸钙
Ca(NO3)2.4H2O
2.49841
590
磷酸二氢钾
KH2PO4
0.49967
68
硫酸镁
MgSO4.7H2O
1.00012
246.5
硝酸钾
KNO3
2.50470
253
二乙铵四乙酸铁钠
EDTA.FeNa
0.1
36.705
使用时稀释1000倍
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