开题医学研究生幻灯片.ppt

欢迎各位专家老师莅临指导 肺泡表面活性物质 研究生:钟红平 导 师: 教授 主要内容 1.选题的目的 2.选题的理论和实际意义 7.目前进展情况 3.主要研究内容 5.主要研究方法 4.主要技术路线 6.预期结果 选题目的 本课题以RDS大白鼠模型和健康大白鼠通过检测KLF2转录因子和KLF2 mRNA在大白鼠肺组织表达以及RDS大鼠甲状腺素水平的变化的研究，确立甲状腺素和KLF2对肺泡Ⅰ型细胞功能调控以及在RDS发病中所起的作用和机制，提出了在对肺表面活性物质治疗不敏感的NRDS中一种新型的治疗选择,为早期给NRDS患儿甲状腺素替代治疗提供理论依据。 选题的理论和意义 　 新生儿呼吸窘迫综合症（Neonatal respiratory distress syndrome NRDS)是新生儿早期死亡的重要原因，临床特点为出生后不久即出现进行性呼吸困难、青紫、呼气性呻吟、吸气性三凹征和呼吸衰竭。本病由于早产儿肺结构不成熟、缺乏肺表面活性物质( PS)引起。病理特征为肺泡壁至终末细支气管壁上广泛嗜伊红透明膜形成并肺不张，若不治疗, 可发生进行性低氧血症和呼吸衰竭, 甚至死亡【1】。NRDS不仅容易发生在早产儿，而且选择性剖宫产足月新生儿也容易发生，目前对NRDS的治疗主要是采用补充外源性的PS联合机械通气治疗，外源性的PS价格非常昂贵。 但值得注意的是约20％至30％NRDS的患儿对表面活性剂替代疗法不敏感【2】，尤其是胎龄越小的早产儿由于肺泡结构发育不成熟，对外源性表面活性剂无反应，建立成功的治疗方案往往因对NRDS的发生、发展的认识而受到很大的限制。因此进一步了解NRDS的发病机制和对外源性表面活性剂无反应机理是十分重要的。 目前对于NRDS的发病机制主要集中在肺泡Ⅱ细胞功能上，近年来对NRDS的认识逐步发展到对肺泡整体细胞功能的调控上，尤其是肺泡Ⅰ型细胞的功能调控越来越受到重视。如何调控肺泡Ⅰ型细胞的功能是目前的研究热点。肺泡I型上皮细胞的功能在NRDS的发病机制中起重要的作用。 国内外经过长期的研究证明【3-5】I型肺泡细胞负责进行气体交换，Ⅱ型肺泡细胞产生PS，降低肺表面张力。糖皮质激素和他们的同源受体已经很早被知道可以促进Ⅱ型肺泡的成熟，来协调PS的产生。产前孕母糖皮质激素的预防应用和新生儿外源性的PS替代治疗作用还是不能降低NRDS的发生和改善部分NRDS的症状，所以目前提出只有I型和II型肺泡细胞功能协调，相互调节平衡才能保证肺泡的扩张和有效的气体交换。但是对于I型肺泡通路控制的细胞介导的气体交换却知之甚少。 Liming Pei等【2】在小鼠的研究中发现SMRT的突变从而导致1型肺泡的早熟，出现一种新型的RDS，尽管对糖皮质激素反应不敏感，但是联合应用抗甲状腺激素类药物完全可以减少SMRT引起的NRDS，表明甲状腺激素受体（hormone receptor TR）在肺发育中的重要作用还没有被认识到。甲状腺激素与甲状腺激素受体作用形成TR-SMRI复合物，激活下游Krüppel样锌指转录因子(Krüppel-like transcription fac-tors,KLFs)中的 KLF2因子，促进肺泡Ⅰ型细胞的分化和成熟，没有KLF2的小鼠会缺乏成熟1型肺泡，最终导致小鼠在生后很短时间内死亡。 死亡的RDS的幼崽和它们同窝出生仔畜相比，肺内KLF2 mRNA和蛋白水平较低，组织学检查发现RDS幼崽出现肺不张，并且有很少典型I型肺泡的扁平细胞，但是有丰富的立方形Ⅱ型样细胞，免疫组织化学显示在他们的肺中I型标记物蛋白显著减少，从SP-B，SP-C和PECAM-1染色判定Ⅱ型肺细胞和血管内皮细胞并没有受到影响，这些结果表明，KLF2在I型肺泡的分化和体内正常的肺发育中是必不可少的。 进一步研究KLFs是Spl/Krüppel样转录因子(Spl-like andKrüppel-like transcription factors,Spl/KLFs)家族中的一个亚家族【6】。在哺乳动物中, KLFs可调控细胞增殖、迁移、凋亡和分化等,它们对早期胚胎发育也至关重要。Krüppel样转录因子2(Kruppel-like factor 2 KLF2), 是当前研究的热点，由于最初被发现主要在肺内高表达，因此也被称为肺Krüppel样转录因子(LKLF) 【7】对肺的发育起关键性作用。 甲状腺激素受体和KLF2是I型肺泡细胞分化、成熟的重要受体和因子，国内外对此的研究刚刚开始，还未涉及它们与NRDS的相互关系，甲状腺激素水平和NRDS的相关性研究很少。 主要研究内容 （2） 通过对移植模型中治疗组与模型对照组肿瘤体积变化、肿瘤重量变化及正常组与模型对照组、各治疗组