我国首例小反刍兽疫诊断报告.PDF

维普资讯 中国动物检疫 2007年第 24卷第 8期 -24- 文章编号：1005—944X(2007)08-0024-03 我国首例小反刍兽疫诊断报告 王志亮- 包静月 吴晓东 刘雨田 李 林 刘佩兰 赵永刚 刘春菊 肖 肖 f中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心 266032) 摘要：2007年 7月我 国西藏发生不明山羊疫情，国家外来动物病诊断中心对当地动物疫病控制 中心送检的 14 只病死山羊病料和一批血清样品分别进行病原学和血清学检测。利用较敏感的小反刍兽疫病毒(PPRV)特异性荧光 定量RT—PCR方法．在 11只病羊组织中检测到小反刍兽疫病毒核酸。利用次敏感的PPRV普通RT—PCR方法， 从 8只病羊组织中检测到PPRv核酸。针对 1号样本病原核酸N基因和F基因片段进行遗传发生分析，该病原属于 4系 利用竞争ELISA试剂盒对送检的 13份血清样本进行抗体检测，结果全部阳性。将 1号组织样本接种Vero细胞 分离病毒．透射电镜观察下．发现了500纳米左右的病毒粒子。对分离毒株进行PCR检测同样证实其为PPRV。 关键词：小反刍兽疫，荧光定量RT—PCR，普通RT—PCR，病毒分离，PPRV特异性抗体 DiagnosisoftheFirstOutbreak ofPestedesPetitsRuminantsin Tibet Abstract：The firstoutbreak ofpeste despetitsruminantsin ovinein Tibetwasconfirmedbymultiple laboratory testsincludingonestep real—time RT—PCR．conventionalRT—PCR。competitiveELISA and virusisolation．Thepres- enceofPPRV wasdetected in 11outof13 field samplesby one step real—time RT—PCR。 amongwhich 8 were further detected by conventionalRT—PCR． Sequence analysis showed thatthe viurs feIIinto the lineage 4 which wasepidemic in MiddleEastand certainwestern Asian countries． One strain ofPPRV was isolated in Vero cell linesfrom field samplesand confirmed by PCR test． Keywords：Pestedespetitsurminants。Real—timeRT—PCR。ConventionalRT—PCR。Viursisolation，PPRV—specific antibody 小反刍兽疫 (PPR)是感染小反刍 等有出血点。绵羊很少发病 。国家外 1．3 病料组织总RNA提取 兽 (特别是山羊和绵羊)的严重的烈 来动物疫病诊断中心接到样品后即 在加有陶珠的组织匀浆管 (R0che公 性、接触性传染病，临床上以高热、坏 启动病原学和血清学检测 ．结果表明 司产品)中．加人 600IxlRLT缓冲液 死性 胃炎、胃肠炎和肺炎为特征．发 本次疫情 由小反刍兽疫病毒引起。是 fRNeasyminiKit试剂盒 ．QIAGEN公 病率和病死率分别可高达 100％和 我国历史上首次爆发记录 司产品)．加人剪碎的淋巴结或直肠组 90％ 该病流行于非洲赤道到撒哈拉 1 材料和方法 织约 30mg．使用 HyBaidRiboLyser 地区、大部分 中东 国家和印度、尼泊 1．1 病料 组织匀浆机进行匀浆处理 ．再使用 尔、塔吉克斯坦等与我国接壤的亚洲 分别来源于 14只羊 的剖 检病 RNeasvminiKit试剂盒提取总 RNA 国家 ，