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中国动物检疫 2007年第 24卷第 8期 -24-
文章编号:1005—944X(2007)08-0024-03
我国首例小反刍兽疫诊断报告
王志亮- 包静月 吴晓东 刘雨田 李 林 刘佩兰 赵永刚 刘春菊 肖 肖
f中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心 266032)
摘要:2007年 7月我 国西藏发生不明山羊疫情,国家外来动物病诊断中心对当地动物疫病控制 中心送检的 14
只病死山羊病料和一批血清样品分别进行病原学和血清学检测。利用较敏感的小反刍兽疫病毒(PPRV)特异性荧光
定量RT—PCR方法.在 11只病羊组织中检测到小反刍兽疫病毒核酸。利用次敏感的PPRV普通RT—PCR方法,
从 8只病羊组织中检测到PPRv核酸。针对 1号样本病原核酸N基因和F基因片段进行遗传发生分析,该病原属于
4系 利用竞争ELISA试剂盒对送检的 13份血清样本进行抗体检测,结果全部阳性。将 1号组织样本接种Vero细胞
分离病毒.透射电镜观察下.发现了500纳米左右的病毒粒子。对分离毒株进行PCR检测同样证实其为PPRV。
关键词:小反刍兽疫,荧光定量RT—PCR,普通RT—PCR,病毒分离,PPRV特异性抗体
DiagnosisoftheFirstOutbreak ofPestedesPetitsRuminantsin Tibet
Abstract:The firstoutbreak ofpeste despetitsruminantsin ovinein Tibetwasconfirmedbymultiple laboratory
testsincludingonestep real—time RT—PCR.conventionalRT—PCR。competitiveELISA and virusisolation.Thepres-
enceofPPRV wasdetected in 11outof13 field samplesby one step real—time RT—PCR。 amongwhich 8 were
further detected by conventionalRT—PCR. Sequence analysis showed thatthe viurs feIIinto the lineage 4 which
wasepidemic in MiddleEastand certainwestern Asian countries. One strain ofPPRV was isolated in Vero cell
linesfrom field samplesand confirmed by PCR test.
Keywords:Pestedespetitsurminants。Real—timeRT—PCR。ConventionalRT—PCR。Viursisolation,PPRV—specific
antibody
小反刍兽疫 (PPR)是感染小反刍 等有出血点。绵羊很少发病 。国家外 1.3 病料组织总RNA提取
兽 (特别是山羊和绵羊)的严重的烈 来动物疫病诊断中心接到样品后即 在加有陶珠的组织匀浆管 (R0che公
性、接触性传染病,临床上以高热、坏 启动病原学和血清学检测 .结果表明 司产品)中.加人 600IxlRLT缓冲液
死性 胃炎、胃肠炎和肺炎为特征.发 本次疫情 由小反刍兽疫病毒引起。是 fRNeasyminiKit试剂盒 .QIAGEN公
病率和病死率分别可高达 100%和 我国历史上首次爆发记录 司产品).加人剪碎的淋巴结或直肠组
90% 该病流行于非洲赤道到撒哈拉 1 材料和方法 织约 30mg.使用 HyBaidRiboLyser
地区、大部分 中东 国家和印度、尼泊 1.1 病料 组织匀浆机进行匀浆处理 .再使用
尔、塔吉克斯坦等与我国接壤的亚洲 分别来源于 14只羊 的剖 检病 RNeasvminiKit试剂盒提取总 RNA
国家 ,
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