第一章生命大分子物质的制备.ppt

生物制品是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制备的，用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品。 1 OD值相当于50微克/ml 双螺旋DNA,相当于40微克/ml 单链DNA（或RNA）,相当于20微克/ml 寡核苷酸. NADH2 具有散发荧光特性 ,反应中 NADH2 量的变化可以用荧光分析法来监测。利用丙氨酸氨基转移酶 ( ALT)酶偶联反应发生 NADH2 量的变化这一原理建立荧光分析法动态监测 AL T活性。结果表明 AL T荧光分析法严格控制实验测定条件 ,其准确度、精密度、灵敏度高 ,特异性好 ,试剂、样品耗量少。 * 伴刀豆球蛋白concanavalin;ConA ，巨刀豆(Cannvalia ensiformis)中的一种球蛋白，有细胞凝集和促有丝分裂作用，因纯化巨刀豆球蛋白时与之相伴得名。为四聚体，每个亚基(27.5 kDa)有Mn2+、Ca2+、糖基结合位点各1个。糖结合专一性为：αMan、Glc、GlcNAc。使红细胞凝集，使淋巴细胞转变为母细胞，使某些动物肿瘤细胞凝集并抑制其生长。 　　伴刀豆球蛋白A （Concanavalin A，Con A）是从刀豆（Jack bean）中提取出来的凝集素。它是四聚体球蛋白，分子量102,000。每个亚基含237个氨基酸残基，分子量25,500，结合一个Ca2+和一个Mn2+，含一个糖结合部位。能与α-甘露糖、α-葡萄糖(细胞膜糖蛋白上)专一地结合，结合位点要求是α-D-吡喃甘露糖或α-D吡喃葡萄糖六元环中的C-3/C-4和C-6未被取代羟基，与以α-1，2糖苷键连接的甘露二糖和甘露三糖有最大的亲和力。 　　Con A具有广阔的适用性，是一种重要的生化和免疫研究试剂。Con A能沉淀多种糖类，葡聚糖和果聚糖等很多其它多糖，以及免疫球蛋白和血型物质等多种糖蛋白，还沉淀肺炎球菌多糖，并能凝集多种红细胞。Con A能和很多细菌和动物细胞反应，能区分某些正常和肿瘤细胞，能促进细胞分裂（促有丝分裂作用）。Con A被用来刺激T细胞产生IL 1样因子，还用于脾细胞增生，研究激活所必需的配体/受体作用。利用免疫组化技术，Con A可用于病理标本中的组织细胞的巨噬细胞展示，区分正常分泌ACTH的垂体细胞和分泌ACTH的腺肿瘤细胞。Con A加强谷氨酸盐神经递质受体的反应，已被用于研究糖基化在离子通道调节中的作用。以Con A为配基的亲和层析介质广泛用于糖蛋白的分离纯化和多糖、糖蛋白糖链结构的研究。 1．血清HCG升高，在育龄妇女，最常见于早孕。正常人受孕后，血中HCG含量即迅速增加，到孕60--80天达到最高峰，峰值为10000—12000μg／L，随后逐渐下降，到孕160～180天时降到最低，但仍明显高于正常，此后又稍回升继续保持到分娩；双胎妊娠时，血清HCG比单胎增加一倍以上；宫外孕时，血清HCG则低于同期正常妊娠值。??? 2．若早孕妇女血清HCG明显低值或连续监测呈下降趋势，则预示先兆流产。??? 3．实施人工流产手术后，若血清HCG值仍明显高于正常或呈上升趋势，则提示手术不彻底。??????? 4．对已排除妊娠的患者，测定血清HCG有助于早期发现异常妊娠性疾病，如葡萄胎、绒毛膜上皮细胞癌等。 ABA是一种较强的生长抑制剂，可抑制整株植物或离体器官的生长。ABA对生长的作用与IAA，GA和CTK相反，它对细胞的分裂与伸长起抑制作用。它抑制胚芽鞘、嫩枝、根和胚轴等器官的伸长生长。 促进休眠 ，在秋季短日下，许多木本植物叶子ABA含量增多，促进芽进入休眠。将ABA施到这些木本植物生长旺盛的小枝上，会引起芽休眠。马铃薯的休眠芽中也含有较多ABA。因此，可用ABA处理马铃薯，以延长其休眠期。 　　红松、桃、板栗、槭树等休眠种子，含有较多的ABA。经低温层积处理几个月后，种子中ABA含量下降，发芽率显著上升。但ABA含量的高低，不一定是种子休眠的直接原因。红松种子外皮的ABA含量高。经水洗后ABA含量明显下降，但发芽率仍很低。进一步分析云南松、油松、华山松、白皮松种子的ABA含量，发现一些松树种子的ABA含量也较高，但不表现休眠。例如，非休眠的华山松种子ABA含量比休眠的红松种子ABA含量高约10倍。 　　莴苣、萝卜等种子的萌发，也受到ABA的抑制。 引起气孔关闭 ：在缺水条件下，植物叶子中ABA的含量增多，引起气孔关闭。这是由于 ABA促进气孔的关闭 A BA促使保卫细胞的K+外渗，细胞失水使气孔关闭。用ABA水溶液喷施植物叶子，可使气孔关闭，降低蒸腾速率。因此，ABA可作为抗蒸腾剂。 过氧化物酶的传统方法是连苯三酚试验法，以过氧化氢为底物，在酶作用下，连苯三酚可形成红棓酚（Pur