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mRNA:(messenger)编码了一个或多个蛋白质序列; tRNA:(transfer)把mRNA上的遗传信息变为多肽中的氨基酸信息; rRNA:(ribosomal)是合成蛋白质的工厂核糖体中的主要成分。 hnRNA:(heterogeneous nuclear)由DNA转录生成的原始转录产物,即前体mRNA。 转录与DNA复制的异同 ?? 相同点: 合成反应的化学本质 模板的使用 合成的方向 发生的部位 不同点:?? (1)转录:一条DNA链为模板 复制:两条链都可作模板; (2)DNA-RNA杂合双链不稳定,RNA合成后释放,而DNA复制结束后,新链和母链形成双链; (3)RNA合成不需引物,而DNA复制需引物; (4) 转录的底物是rNTP,复制的底物是dNTP;碱基由复制时的T替换为转录时的U。 (5)聚合酶系统不同。 有义链的确定 把与mRNA序列相同的那条DNA链称为编码链(coding strand)或称有意义链(sense strand)(+); 把另一条根据碱基互补原则指导mRNA合成的DNA链称为模板链(template strand)或称反义链(antisense strand)(-)。 在体外DNA的两条链都可作为RNA合成的模板。 转录的基本特点: (1)以核糖核苷三磷酸(rNTP)为底物,以Mg2+/Mn2+为辅助因子; (2)仅以一条DNA链为模板; (3)按5′ 3′方向合成; (4)无需引物的存在能单独起始链的合成; (5)第一个引入的rNTP是以三磷酸形式存在; (6)RNA的序列和模板是互补的。 (7)需要RNA聚合酶和多种辅助因子参与。 E.coli中不同的?因子 可识别不同的启动子 RNApol执行多种功能 (1) 识别DNA双链上的启动子; (2) 使DNA变性,在启动子处解旋成单链; (3)通过阅读启动子序列,RNApol确定它自己的转录方向和模板链。 (4) 起始,延伸RNA链,最后当它达到终止子时,通过识别终止序列停止转录。 一般由8-16个亚基组成,相对分子量超过5×105 。共同点:(1)聚合酶中有两个相对分子质量超过1×105 的大亚基;(2)同种生物三类聚合酶有“共享”小亚基的倾向,几个小亚基是其中3类或2类聚合酶所共有的。 真核生物三种RNA聚合酶的特点 RNA Pol 位置 产物 相对活性 对α-鹅膏蕈碱的敏感性 Pol Ⅰ 核仁 28S,18S,5.8S rRNAs 50~70% 不敏感 Pol Ⅱ 核质 hnRNA,mRNA,某些SnRNA 20~40% 高度敏感 Pol Ⅲ 核质 tRNA,5SrRNA,某些SnRNAs ~10% 存在特异性,中等敏感 转录因子 转录复合体 TBP TAFs TFIIA TFIIB TFIIF Pol II TFIIE RNA pol Ⅱ的转录起始 表12-5 人类Ⅱ型启动子的转录因子 因子 分子量 功能 RNAPolⅡ ≥10K 依赖模板合成RNA TFⅡA 12,19,35K 稳定TFⅡD和DNA的结合,激活TBP亚基 TFⅡB 33K 结合模板链(-10~+10),起始PolⅡ结合,和TFⅡE/F 相互作用 TFⅡD (TBP,30K) TBP亚基识别TATA,将聚合酶组入复合体中,TAFs识别 特殊启动子 TFⅡE 34K(β) 结合在PolⅡ的前部,使复合体的保护区延伸到下游 57K(α) TFⅡF 38, 74K 大亚基具解旋酶活性(RAP74),小亚基和PolⅡ结合, 介导其加入复合体 TFⅡH 具激酶活性,可以磷酸化PolⅡC端的CTD,使PolⅡ逸出,延伸 TFⅡI 120K 识别Inr,起始TFⅡF/D结合 TFⅡJ 在TFⅡF后加入复合体,不改变DNA的结合方式 TFⅡS RNA合成延伸 启动子的结构 (1)结构典型,都含识别(R),结合(B)和起始
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