影响蟾蜍坐骨神经冲动传导速度的因素.doc

PAGE 4 影响蟾蜍坐骨神经冲动传导速度的因素（方案） 【目的要求】 学习测定蟾蜍离体坐骨神经干上神经冲动传导速度的方法和原理。 观察温度（37℃）、3%KCl、5%NaCl、2%普鲁卡因对蟾蜍离体坐骨神经冲动传导速度的影响。 【基本原理】 神经兴奋的发生和传导有赖于细胞膜上Na＋内流。其客观指标是神经兴奋时产生的动作电位。普鲁卡因等局麻醉药可阻滞Na离子内流，从而抵制神经冲动的发生与传导速度的减慢。 神经纤维的静息电位接近K离子的平衡电位，故细胞外液K离子浓度升高可使细胞膜内外浓度差减小，K离子平衡电位减小，膜发生去极化。在此基础上，由于Na离子通道受到抑制，神经干传导速度降低；当细胞外夜Na离子内流减弱，也可以使神经干传导速度减慢。 【实验对象及器材】 实验对象：蟾蜍 实验器材：常用手术器械（手术剪，手术镊，手术刀，金冠剪，眼科剪、镊，毁髓针，玻璃分针）、娃板、纱布（卫生纸）、粗棉线、恒温箱、3%KCl、5%NaCl、2%普鲁卡因、PC机、信号采集处理系统、电子刺激器、神经屏蔽盒、Ringer’s液 【方法与步骤】 蟾蜍坐骨神经干的标本制备 取蟾蜍1只，双毁髓后在尚难部用粗剪将脊柱剪短，撕下皮肤和内脏。将带有部分脊柱、后肢的标本用任氏液洗净，置于娃解剖盘上。在神经出脊柱处，用粗棉线结扎一侧坐骨神经，并于结扎点与脊柱之间将神经剪断。然后轻轻提起结扎线，沿坐骨神经的走向，用组织剪将包绕坐骨神经的肌肉一同剪至膝关节，并在此将坐骨神经和肌肉剪断。如果蟾蜍较小，应该继续沿膝关节向下用上述方法把胫、腓神经及其周围组织与其他组织分离，至裸关节处剪断。将带有部分肌肉的坐骨神经放在盛有少量任氏液的培养皿中，一手用镊子夹住包绕神经的肌肉，另一只手提起结扎线轻轻一拉，神经与肌肉就可分离开来。然后用眼科剪剪掉较长的时间分支，用粗棉线结扎神经的外周端。如此，一条坐骨神经标本就制作完毕。 实验装置的连接 将神经屏蔽盒与信号采集处理系统连接，屏蔽盒的地线良好接触。 仪器的操作和实验参数的设置 (1)仪器的设定。 “采集窗口”要把通道2和通道4均设置上。引导电极使用两对，同时引导两对引导电极下的动作电位图形，两对引导电极之间的间隔距离尽量大一些。近刺激端的一对（R3和R4）输入生理信号采集系统的通道2，原理刺激端的一对（R5和R6）输入生理信号采集系统的通道4。 (2)测定两对引导电极的动作电位时差。 用鼠标点击“开始”，然后再点击“刺激”，这时，显示窗口的通道2就显示第一对引导电极引导出的动作电位图形，而通道4则显示第二对引导电极引导出的动作电位图形。调整好实验显示窗口动作电位的图形。由于第二队对引导电极距离刺激点更远，所以通道4中动作电位图形出现的比较靠后。用数遍点击“快捷工具栏”中的“观察”，拖动鼠标分别测出通道2和通道4两个动作电位的起始点，即测出两个动作电位的时间差（ms）。 （3）测量两对引导电极神经干的长度。 使用毫米刻度尺准确量出量对引导电极的距离，即为神经干的长度。 （4）按照公式V=S/t，计算出蟾蜍神经干的兴奋传导速度（m/s），此项速度即为未做任何处理（室温）时的蟾蜍坐骨神经干冲动传导速度。 4.将坐骨神经取下放在装有37℃任氏液（10ml）的培养皿中，保持恒温10-15min 5.将坐骨神经干取下放在室温任氏液中2-3min，再滴加3%KCl溶液2-3滴，按照同样的方法测量坐骨神经传导速度。 6.将坐骨神经干取下放在室温任氏液中2-3min，再滴加5%NaCl溶液2-3滴，按照同样的方法测量坐骨神经传导速度。 7. 将坐骨神经干取下放在室温任氏液中2-3min，再滴加2%普鲁卡因溶液3-4滴，按照同样的方法测量坐骨神经传导速度。 8.打印实验数据并收拾实验桌面。 【实验报告】 按照实验报告标准完成实验报告并比较常温、37℃、3%KCl、5%NaCl、2%普鲁卡因作用下蟾蜍坐骨神经