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四大类微生物菌落形态的比较和识别 一、实验目的和内容 目的： 1 熟悉四大类微生物菌落的主要特征 2 掌握识别四大类微生物菌落形态的依据和要点，并应用于识别未知菌落 内容： 1 观察已知的四大类微生物菌落特征 2 辨认未知的四大类微生物菌落特征 实验原理 掌握识别四大类微生物菌落形态的要点对于从事菌种的筛选、杂菌的识别和菌种鉴定等项工作都有重要意 义。 菌落是由某一微生物的少数细胞或孢子在固体培养基表面繁殖后所形成的子细胞群体，因此，菌落形态在 一定程度上是个体细胞形态和结构在宏观上的反映。由于每一大类微生物都有其独特的细胞形态，因而其 菌落形态特征也各异。 在四大类微生物的菌落中， 细菌和酵母菌的形态较接近， 放线菌和霉菌形态较相似。 菌和酵母菌的异同 细菌和多数酵母菌都是单细胞微生物。菌落中各细胞间都充满毛细管水、养料和某些代谢产物，因此，细 菌和酵母菌的菌落形态具有尖似的特征，如湿润、较光滑、较透明、易挑起、菌落正反面及边缘、中央部 位的颜色一致，且菌落质地较均匀等。它们之间的区别如下： 细菌：由于细胞小，故形成的菌落也较小，较薄、较透明且有“细腻”感。不同的细菌会产生不同的色素， 因此常会出现五颜六色的菌落。此外，有些细菌具有特殊的细胞结构，因此，在菌落形态上也有所反映， 如无鞭毛不能运动的细菌其菌落外形较圆而凸起； 有鞭毛能运动的细菌其菌落往往大而扁平， 周缘不整齐， 而运动能力特强的细菌则出现更大、更扁平的菌落，其边缘从不规则、缺刻状直至出现迁居性的菌落，例 如变形杆菌属和菌种。具有荚膜的细菌其菌落更粘稠、光滑、透明。荚膜较厚的细菌其菌落甚至呈透明的 水珠状。有芽孢的细菌常因其折光率和其他原因而使菌落呈粗糙、不透明、多皱褶等特征。细菌还常因分 解含氮有机物而产生臭味，这也有助于菌落的识别。 酵母菌： 由于细胞较大 （直径约比细菌大 10 倍）且不能运动， 故其菌落一般比细菌大、 厚而且透明度较差。 酵母菌产生色素较为单一，通常呈矿蜡色，少数为橙红色，个别是黑色。但也有例外，如假丝酵母因形成 籍节状的假菌丝，故细胞易向外圈蔓延，造成菌落大而扁平和边缘不整齐等特有形态。酵母菌因普遍能发 酵含碳有机物而产生醇类，故其菌落常伴有酒香味。 2．放线菌和霉菌的异同 放线菌和霉菌的细胞都是丝状的， 当生长于固体培养基上时有营养菌丝 （或基内菌丝）和气生菌丝的分化。 气生菌丝向空间生长，菌丝之间无毛细管水，因此菌落外观呈干燥、不透明的丝状、绒毛状或皮革状等特 征。由于营养菌丝伸入培养基中使菌落和培养基连接紧密，故菌丝不易被挑起。由于气生菌丝、孢子和营 养菌丝颜色不同，常使菌落正反面呈不同颜色。丝状菌是以菌丝顶端延长的方式进行生长的，越近菌落中 心的气生菌丝其生理年龄越大，也越早分化出子实器官或分生孢子，从而反映在菌落颜色上的变化，一般 情况下，菌落中心的颜色常比边缘深。有些菌的气生菌丝还会分泌出水溶性色素并扩散到培养基中而使培 养基变色。有些菌的气生菌丝在生长后期还会分泌滴，因此，在菌落上出现“水珠”。 放线菌：放线菌属原核生物，其菌丝纤细，生长较慢，气生菌丝生长后期逐渐分化出孢子丝，形成大量的 孢子，因此菌落较小，表面呈紧密的绒状或粉状等特征。由于菌丝伸入培养基中常使菌落边缘的培养基呈 凹状。不少放线菌还产生特殊的土腥味或冰片味。 霉菌：霉菌属真核生物，它们的菌丝一般较放线菌粗（几倍）且长（几倍至几十倍），其生长速度比放线 菌快，故菌落大而疏松或大而紧密。由于气生菌丝会形成一定形状、构造和色泽的子实器官，所以菌落表 面往往有肉眼可见的构造和颜色。 根据上述特征可将四大类微生物菌落的识别要点归纳如下： 三、实验材料和用具 已知菌落：细菌类（大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌） 酵母（酿酒酵母） 放线菌类（细黄链霉 菌） 霉菌类（产黄青霉、黑曲霉、黑根霉） 未知菌落 试剂：培养基（牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯培养基和高氏 1 号培养基） 四、操作步骤 1 制备已知菌的单菌落 通过平板划线法获得细菌、 酵母菌和放线菌的单菌落。 用三点接种法获得霉菌的单菌落。 细菌平板放 37 恒 温培养 24~48 小时。酵母菌平板置 28 培养 2~3 天。霉菌和放线菌置 28 培养 5~7 天。待长成菌落后，