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芽孢杆菌分离筛选与培养 枯草芽饱杆菌是芽饱杆菌属的模式种， 很少成链，通常为 0.7~0.8 μm× 2.0~3.0 μm，营养细胞杆状，杆端钝圆，单生或成短链，能运动，革兰氏染色 一致呈阳性， 芽孢 中生或偏生 ，芽孢呈椭圆或长简形。 无荚膜，周生或 侧生鞭毛， 游离孢子表面着色弱， 菌落形态变化较大， 粗糙，表面干燥， 不透明， 灰白色或 微带黄色，扩散（蔓延）生长。斜面丰厚粗糙，不透明，蜡质蔓延，奶油色至 微褐色。在液体培养基表面形成银白色较厚的具皱纹的菌膜。可利用蛋白质、 多种糖及淀粉，广泛分布在土壤、水体及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁 殖。 琼脂培养基上的菌落圆或不规则形， 表面色暗， 变厚和不透明， 可起皱， 可呈奶 油色或褐色， 菌落的形状随培养基成分不同而有很大变化。 当琼脂培养基表面潮 湿时， 菌落易于扩散。 在琼脂培养基上生长的菌苔在液体中不易扩散。 在培养液 中生成色暗、皱褶、完整的膜，培养液轻度混浊或不混浊。有氧时生长旺盛，在 含有葡萄糖的复杂培养基中可进行厌氧代谢， 但其生长和发育都较弱， 生长温度 最高为 45~55℃，最适为 37℃。 枯草芽孢杆菌生理生化特性：液化明胶 冻化牛乳 还原硝酸盐 不产生吲哚，硫 化氢 V-P 反应阳性，水解淀粉。葡萄糖发酵产酸不产气，需氧。 地 衣 芽 孢 杆 菌 孢 囊 不 膨 大 ，无 伴 孢 晶 体 ， 中生 卵 圆 型 芽 孢 ， 周 围 鞭 毛 ， 无 荚 膜 。 革 兰 氏 液 染 色 呈 紫 色 阳 性 菌 。 细 胞 大 小 一 般 在 0.9~1.2 × 2.2~3.8 微 米 。菌 落 呈 灰 白色 、 边 缘 不 整 齐 的 扁 平 菌 落 。 1. 样品： 外购菌种 商品微生物制剂（固体或液体） 土壤水体或枯枝烂叶，腐 烂稻草（记录取样位置 PH 植被情况等）。 2. 菌种分离与纯化 2.1 ．培养基 2 4 2.1.1 可溶性淀粉 3g/L 蛋白胨 10g/L 酵母膏 3g/L KH2PO41.5g/L K HPO2g/L 4 MgSO0.1g/L PH 7.4 — 7.6 （富集用） 2.1.2 肉汤（ NA）培养基（ 营养琼脂 ）： 蛋白胨 10g/L 牛肉膏 3-5g/L NaCl5g/L PH7.2 — 7.4 （保存计数或分离纯化 用） 营养琼脂：麦芽汁培养基 =1：1 混合使用，菌落不易扩散，形态特征典型 2 4 2.1.3 蛋白胨 10g/L 酵母膏 5g/L 葡萄糖 3.5g/L NaCl5g/L K HPO0.5g/L MgSO4 3g/L MnSO4 25mg/L PH 7.2 —7.4 （分离纯化用） 2.1.4 产淀粉酶菌株筛选培养基： 可溶性淀粉 3-5g/L 蛋白胨 10g/L 牛肉膏 3-5g/L NaCl 5g/L PH7.2 —7.4 （用 于淀粉酶产生菌分离筛选） 2.1.5 产蛋白酶菌株筛选培养基 2.1.5.1 酪素培养基 ： 1 ★★ 2.1.5.1.1 葡萄糖 1g/L ，酵母膏 1g/L ，酪素 4-5g/L ，K2HPO41g/L ，KH2PO4 0.5g/L ，MgSO4 0.1g/L 蒸馏水 1000ml，