行为药理学研究方法.ppt

抑郁症的发病机制 可能与脑内单胺类神经功能紊乱有关，主要表现为神经传导通路上的神经递质5- 羟色胺含量不足或功能降低，进而引起去甲肾上腺素（NE）功能减弱，胆碱能神经系统相对占优势。另外还与氨基丁酸、环磷酸腺苷和磷脂酰肌醇系统不平衡有关。 1. 利血平诱发的小鼠体温降低实验 原理：利血平能通过耗竭单胺类神经递质而使小鼠出现僵住症、眼睑下垂及体温降低，可模拟抑郁症的行为表现。抗抑郁药能拮抗此现象。 观察指标：尾静脉注射利血平后测定小鼠体温，以各测定时间点体温降低值作为指标。 2.阿扑吗啡拮抗实验 原理：阿扑吗啡是DA受体激动剂，能引起动物高活动性，多次给药可引起行为敏化、刻板行为及动物体温下降，也能反映药物对中枢去甲肾上腺素重摄取及对去甲肾上腺素传递的影响。 观察指标：皮下注射阿扑吗啡后测定小鼠体温，以各测定时间点体温降低值作为指标。 3. 5-羟色胺酸诱导甩头实验原理：5-HT前体5-HTP能诱导小鼠甩头。抗抑郁药能够增强5-HTP的作用。 观察指标：小鼠的甩头次数。 4.育亨宾增强实验 原理：育亨宾与神经元突触前膜的α2受体结合后，阻断NE释放的负反馈机制，使NE大量释放，NE神经功能增强，会导致动物死亡。当具有NE神经活化作用的抗抑郁剂与其合用后，NE神经功能进一步增强，可显著加强育亨宾的致死作用。 观察指标：注射育亨宾18 h 后各组小鼠的死亡率。 应激模型  1. 小鼠强迫游泳模型 2. 小鼠悬尾模型 3. 大鼠获得性无助模型 4. 不可预知的长期应激刺激 5. 不可预知的长期温和应激刺激 1.小鼠强迫游泳实验 原理：是一种行为绝望模型。将小鼠放于内径盛水的玻璃容器内，小鼠经过一定时间的挣扎后，自感逃生无望，放弃挣扎，漂浮不动。抗抑郁药能缩短其不动时间。 观察指标：记录小鼠在容器内累计漂浮不动时间，即为抑郁时间。 2.小鼠悬尾实验 原理：也是一种行为绝望模型。将小鼠倒吊于离地面2尺左右的横杆上，固定点为小鼠尾梢处。小鼠为克服不正常的体位而挣扎，但活动一定时间后，自感逃生无望，出现间断性的不动，显示绝望状态。抗抑郁药能缩短其不动时间。 观察指标：记录小鼠累计不动时间，即为抑郁时间。 3.大鼠获得性无助模型 原理：也是一种行为绝望模型。大鼠在遭受无法逃避的电击以后，将其放在可以逃避电击的环境时，也呈现逃避行为缺失,而抗抑郁剂能够翻转或减少这种行为缺失。获得性无助是一种动物在接受无法控制或预知的厌恶性刺激后所表现的长期的逃避能力缺乏的行为现象,这种模型的行为特征与人类抑郁症的症状表现具有相似性。 观察指标： 实验采用穿梭箱完成，分两阶段进行 获得性无助抑郁模型诱导期。第1天实验时将大鼠放入实验箱中，连续给予60次无信号不可逃避的双室足底电击,采用0.8mA电流,每次电击持续15 s,间歇期半随机化(程序控制为45 s、60 s和75 s) ,每只大鼠训练1次。正常组动物放入实验箱内同样时间,但不给予足底电击。 条件性回避反应学习期。训练时,将大鼠放入操作箱中，适应5min后，连续进行30个运行周期。每个运行周期的时间为30s，依次为3 s条件刺激（灯光）期，3 s条件+非条件刺激(电击0.8mA) 期和24 s间歇期(不给任何刺激)。 当大鼠在仅有灯光的条件刺激期穿梭到箱的另一侧以免遭电击时,记为回避反应；当大鼠在同时具有灯光和电击刺激的情况下穿梭到箱的另一侧以躲避电击时,则记为逃避反应。 记录回避次数及逃避次数。 4.不可预知的长期应激刺激 原理：电动物连续接受长时间的应激刺激后，会造成类似人的抑郁状态。具体的应激刺激包括： 电击足底、禁食48 h 高速水平震荡、4℃冰水游泳 禁水24 h、夹尾 45℃热刺激、昼夜颠倒 5.不可预知的长期温和应激刺激 原理与以上类似，应激状态更温和。 观察指标： 1、采用敞箱完成，分两阶段进行 抑郁模型诱导期。共21天，给予慢性应激，其后测试大鼠在敞箱中的穿格次数和排便次数。 2、采用穿梭箱完成，也分两阶段。 抑郁模型诱导期。共21天，给予慢性应激，其后测试大鼠在穿梭箱中的回避次数及逃避次数。 脑损伤模型 嗅球切除模型原理：大鼠在切除嗅球以后一段时间，其行为和生化改变特点类似于人的抑郁症。主要表现如下，抗抑郁药可改善之： 自主活动增加 学习记忆障碍 REM睡眠的变化 对应激的高反应性 72秒低频率差式强化模型 原理：是一种变化的操作性条件反射。动物在压杆一次后，需要等待72秒以后再次压杆才有可能出