紫外可见分光光度法gai.ppt

第六章吸光光度法 目 录 §6.1 基本原理 §6.2 紫外-可见分光光度计 §6.3 显色与测量条件的选择 §6.4 分光光度测定方法 §6.5 应用与进展 §6.1 基本原理 一 紫外可见吸收光谱 2、物质对光的选择性吸收及吸收曲线 吸收曲线的讨论： 三、光的吸收定律 透光度(透光率)T 2、摩尔吸光系数ε的讨论 3、 偏离朗伯—比耳定律的原因 2 化学性因素 定量分析-工作曲线 §5.2 紫外—可见分光光度计一、基本组成 2、单色器 3 样品室 二、分光光度计的类型简介 §6.3 显色与测量条件的选择 4、显色剂 二、显色反应条件的选择 三、共存离子干扰的消除 2、选择合适的参比溶液 参比溶液的选择一般遵循以下原则： ⑴若仅待测组分与显色剂反应产物在测定波长处有吸收，其它所加试剂均无吸收，用纯溶剂（水)作参比溶液； ⑵若显色剂或其它所加试剂在测定波长处略有吸收，而试液本身无吸收，用“试剂空白”(不加试样溶液)作参比溶液； ⑶若显色剂无吸收,而待测试液中有其它离子在测定波长处有吸收，则可用“试样空白”(不加显色剂)作参比溶液； ⑷若显色剂、试液中其它组分在测量波长处有吸收，则可在试液中加入适当掩蔽剂将待测组分掩蔽后再加显色剂，作为参比溶液。 3、控制适宜的吸光度（读数范围） 四、提高光度测定灵敏度和选择性的途径 §6.3 分光光度测定方法 二、示差分光光度法（示差法） 三、双波长分光光度法 选择波长组合λ1 、λ2的基本要求是： 五、导数分光光度法 §6.4 、有机合物结构紫外光谱辅析 请选择下一章： 有机化合物结构解析初步 * * 基于物质光化学性质而建立起来的分析方法称之为光化学分析法。 分为:光谱分析法和非光谱分析法。 光谱分析法是指在光（或其它能量）的作用下，通过测量物质产生的发射光、吸收光或散射光的波长和强度来进行分析的方法。 在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法,主要有: 红外吸收光谱：分子振动光谱，吸收光波长范围2.5?1000 ?m ,主要用于有机化合物结构鉴定。 紫外吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围200?400 nm（近紫外区） ，可用于结构鉴定和定量分析。 可见吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围400?750 nm ，主要用于有色物质的定量分析。 本章主要讲授紫外可见吸光光度法。 1．光的基本性质 光是一种电磁波，具有波粒二象性。光的波动性可用波长?、频率?、光速c、波数（cm-1）等参数来描述： ? ? = c ； 波数 = 1/ ? = ?/c 光是由光子流组成，光子的能量： E = h ? = h c / ? （Planck常数：h=6.626 ? 10 -34 J ＊ S ) 光的波长越短（频率越高），其能量越大。 白光（太阳光）：由各种单色光组成的复合光 单色光：单波长的光（由具有相同能量的光子组成） 紫外光区：远紫外区10 - 200 nm （真空紫外区） 近紫外区200 - 400 nm 可见光区：400-750 nm M + 热 M + 荧光或磷光 ?E = E2 - E1 = h ? ：量子化 ；选择性吸收 吸收曲线与最大吸收波长? max 用不同波长的单色光照射，测吸光度 M + h ? ? M * 基态 激发态 E1 （△E） E2 光的互补：蓝?? 黄 ①同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax ②不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似λmax不变。而对于不同物质，它们的吸收曲线形状和λmax则不同。 ③吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一。 ?不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度A有差异，在λmax处吸光度A的差异最大。此特性可作为物质定量分析的依据。 ?在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。 1、 朗伯—比耳定律 布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系。A∝b 1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有类似的关系。A∝ C 二者的结合称为朗伯—比耳定律，其数学表达式为： A＝lg（I0/It)= εb c 式中A：吸光度；描述溶液对光的吸收程度；